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    我公司的Elisa試劑盒用于科研,，可以檢測血清,、血漿等樣本含量。而Elisa可以分為多種類型,，雙抗體夾心法就是其中的一種,。在今天的技術(shù)資訊中，上海恒遠生物來跟您說說Elisa雙抗體夾心法檢測未知抗原技術(shù)有學問：

　　1.包被：用0.05MPH9.牰碳酸鹽包被緩沖液將抗體稀釋至蛋白質(zhì)含量為1～10μg/ml,。在每個聚苯乙烯板的反應(yīng)孔中加0.1ml,，4℃放置一個晚上。次日,，棄去孔內(nèi)溶液,，用洗滌緩沖液洗3次，每次3分鐘,。(簡稱洗滌,，下同)。

　　2.加樣：加一定稀釋的待檢樣品0.1ml于上述已包被之反應(yīng)孔中,，置37℃孵育1小時,。然后洗滌。(同時做空白孔,，陰性對照孔及陽性對照孔),。

　　3.加酶標抗體：于各反應(yīng)孔中，加入新鮮稀釋的酶標抗體(經(jīng)滴定后的稀釋度)0.1ml,。37℃孵育0.5～1小時,，洗滌,。

　　4.加底物液顯色：于各反應(yīng)孔中加入臨時配制的TMB底物溶液0.1ml，37℃10～30分鐘,。

　　5.終止反應(yīng)：于各反應(yīng)孔中加入2M硫酸0.05ml,。

　　6.結(jié)果判定：可于白色背景上，直接用肉眼觀察結(jié)果：反應(yīng)孔內(nèi)顏色越深,，陽性程度越強,，陰性反應(yīng)為無色或極淺，依據(jù)所呈顏色的深淺,，以“+",、“-"號表示。也可測OD值：在Elisa檢測儀上,，于450nm(若以ABTS顯色,，則410nm)處，以空白對照孔調(diào)零后測各孔OD值,，若大于規(guī)定的陰性對照OD值的2.1倍,，即為陽性。

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