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酶聯(lián)免疫的條件與測定方法有什么關(guān)系
閱讀：1642 發(fā)布時(shí)間：2014-9-17 實(shí)驗(yàn)要在良好的環(huán)境中執(zhí)行操作,，實(shí)驗(yàn)的條件也是非常重要的,，而針對酶聯(lián)免疫測定的條件與其測定方法有著一定的關(guān)系,，今天上海恒遠(yuǎn)就來和您說說它們之前有什么關(guān)系,。
定性測定的結(jié)果判斷是對受檢標(biāo)本中是否含有待測抗原或抗體作出有或無的簡單回答,，分別用陽性、陰性表示,。 表示該標(biāo)本在該測定系統(tǒng)中有反應(yīng),，陰性則為無反應(yīng)。
用定性判斷法也可得到半定量結(jié)果,，即用滴度來表示反應(yīng)的強(qiáng)度,，其實(shí)質(zhì)仍是一個(gè)定性試驗(yàn)。在這種半定量測定中,，將標(biāo)本作一系列稀釋后進(jìn)行試驗(yàn),，呈陽性反應(yīng)的zui高稀釋度即為滴度。根據(jù)滴度的高低,，可以判斷標(biāo)本反應(yīng)性的強(qiáng)弱,，這比觀察不稀釋標(biāo)本呈色的深淺判斷為強(qiáng)陽性、弱陽性更具定量意義,。
在間接法和夾心法ELSIA中,，陽性孔呈色深于陰性孔。在競爭法ELISA中則相反,，陰性孔呈色深于陽性孔,。
而酶聯(lián)免疫試劑盒的回收率與真實(shí)成分有緊密的關(guān)系，回收率是反應(yīng)待測物在樣品分析過程中的損失的程度,，損失越少,，回收率越高，假如作標(biāo)液1PPM,，就是1毫克/升,，而作出尺度數(shù)據(jù)為0.99毫克/升，就是說您的回收率是99%,，這個(gè)說明了方法的正確度,。
·空白管陽性高：
1.樣本本身就是陽性樣本，換陰性樣本做回收率。
2.空白管在實(shí)驗(yàn)中被污染,，實(shí)驗(yàn)中防止交叉污染,。
3.水質(zhì)原因用，娃哈哈礦泉水代替,。
·假陰,、陽性：
1.水質(zhì)原因：點(diǎn)復(fù)溶液驗(yàn)證，用娃哈哈礦泉水代替,；
2.實(shí)驗(yàn)操作原因,。吸取到其它相吹干，準(zhǔn)確的取液吹干,。離心不*,，延長離心時(shí)間。樣本的污染,，更換樣本乳化未處理*,。溫浴（70℃）處理乳化現(xiàn)象,；
3.儀器試劑原因,。離心管未清洗干凈，正確的洗滌器具,。有機(jī)溶劑的影響,，做試劑空白看影響結(jié)果；
4.衍生化試劑原因（長時(shí)間衍生化試劑變質(zhì)）,，更換衍生化試劑,；
5.與曲線好壞相關(guān)，保證曲線的正常,。
在從冰箱拿出的標(biāo)本要預(yù)溫至室溫,，對冰凍的樣品要融化好，并充分混勻再用,。假如忽視了影響其結(jié)果的因素,，難免會造成假陰性或假陽性。了解影響實(shí)驗(yàn)的因素,，減少差錯事故的發(fā)生是極其必要的,。對不能及時(shí)檢測的標(biāo)本要妥善保留于4℃冰箱，做好原始記實(shí),，標(biāo)本管上標(biāo)上待檢者姓名,、日期。
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