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恒遠(yuǎn)為您簡述SNP培養(yǎng)基測序的兩種方法
閱讀:1790 發(fā)布時(shí)間:2014-5-23 還有一周多一點(diǎn)就是端午節(jié)了,,而今天也是本周的zui后一日,,這其中您購買我公司產(chǎn)品是會(huì)送出五芳齋粽子的,而且口味是有客戶的,,一年也不過就這么一次端午節(jié),,朋友們現(xiàn)在買試劑就送粽子了哦!
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方法一:直接測序法進(jìn)行SNP分析
在所有SNP的檢測方法中,,對(duì)欲檢測片段進(jìn)行直接擴(kuò)增,、測序是zui為準(zhǔn)確的方法。通常情況下,,純合型SNP位點(diǎn)的測序峰為單一峰型,,而雜合型SNP位點(diǎn)的測序峰為套峰,因而很容易將其區(qū)分開來。通過直接測序方法進(jìn)行SNP檢測的檢出率接近100%,。
方法二:PCR-SSCP方法
單鏈構(gòu)象多態(tài)性分析是一種簡單,、地檢測DNA或RNA序列中點(diǎn)突變的技術(shù),由于實(shí)驗(yàn)成本較低,,也是一種目前較為常用的方法,。
★ zui后,上海恒遠(yuǎn)高質(zhì)量培養(yǎng)基提醒您,,這其中需要注意的問題:
1,、PCR-SSCP只能作為一種突變檢測方法,要zui后確定突變的位置和類型,,還需進(jìn)一步測序,。
2、由于SSCP是依據(jù)點(diǎn)突變引起單鏈DNA分子立體構(gòu)象的改變來實(shí)現(xiàn)電泳分離的,,這樣就可能會(huì)出現(xiàn)當(dāng)某些位置的點(diǎn)突變對(duì)單鏈DNA分子立體構(gòu)象的改變不起作用或作用很小時(shí),,再加上其他條件的影響,使聚丙烯酰胺凝膠電泳無法分辨造成漏檢,。
3,、經(jīng)實(shí)驗(yàn)證明小于300bp的DNA的片段中的單堿基突變,90%可被SSCP發(fā)現(xiàn),。