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技術(shù)文章

凝膠制備中有哪些方法

閱讀:1785          發(fā)布時(shí)間:2013-9-3

凝膠制備中有哪些方法

凝膠制備:

1.玻璃板對(duì)齊后放入夾中,,垂直卡緊,,加滿水檢漏。

2.配10%分離膠,,APS和TEMED作用為促凝,,zui后灌膠前加。若板不漏水,,則將水倒出,,并用吸水紙洗凈后灌膠,灌至大約3/4處,,上面加滿水壓平,。

3.配濃縮膠,同樣地,,APS和TEMEDzui后加,分離膠灌入約30min后觀察小燒杯中剩余分離膠是否已凝,,同時(shí)仔細(xì)觀察可見玻板水和膠間有一條折線,,說(shuō)明膠已凝固。

4.將上面的水倒去,,吸水紙洗凈,,灌入濃縮膠,灌滿,,注意一定不要有氣泡,,然后將梳子插入,,注意保持水平,約30min后凝固可用,。

5.拔梳子在電泳緩沖液中拔,,加樣孔用小針筒沖洗干凈再上樣,注意上樣時(shí)勿使樣品逸至鄰孔,,樣品混勻時(shí)要輕,,不要產(chǎn)生氣泡,否則加樣時(shí)易導(dǎo)致逸出而使結(jié)果不準(zhǔn)確,。

上海恒遠(yuǎn)以*產(chǎn)品為標(biāo)準(zhǔn),,自主研究開發(fā)了一系列應(yīng)用于分子生物學(xué)、蛋白質(zhì)學(xué),、免疫學(xué)研究的相關(guān)產(chǎn)品,,并代理了國(guó)外Amresco、Sigma,、Pharmacia等品牌的生物試劑,,力爭(zhēng)成為生物技術(shù)zui的產(chǎn)品供應(yīng)商。Ø   

 酶譜法的基本過程是先將樣品進(jìn)行SDS-聚丙烯酰胺(SDS-PAGE,,含0.1%明膠)電泳分離,,然后在有二價(jià)金屬離子存在的緩沖系統(tǒng)中使樣品中的MMP-2和MMP-9恢復(fù)活性,在各自的遷移位置水解凝膠里的明膠,,zui后用考馬斯亮藍(lán)將凝膠染色,,再脫色,在藍(lán)色背景下可出現(xiàn)白色條帶,,條帶的強(qiáng)弱與MMP-2和MMP-9活性成正比,。咨詢?cè)敿?xì)信息。

 

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