IgA的純化 血清中IgA的含量較低,,一般從乳汁中提取分泌型IgA,。 【材料和試劑】 (1)人初乳Xml,。 (2)生理鹽水(NS),,HCl,。 (3)2mol/L Tris,0.1mol/L pH6.3 PB,。 (4)0.01mol/L,, pH7.5(含0.1mol/L NaCl)和0.01mol/L,pH7.7(含0.25mol/L NaCl)的PB,。 【操作步驟】 (1)取Sephadex G-200 25g,,經(jīng)蒸餾水充分膨脹后,以0.01mol/L,,pH6.3的PB平衡并裝柱,,柱床體積為2.5cm×100cm。 (2)將10ml NS緩慢加入初乳中,,混勻,,43000r/min 4℃離心60min。 (1)吸出中層乳清液,,以1mol/L HCl調(diào)至pH4.0,,4℃ 24000r/min離心30min。 (2)吸取上清以2mol/L Tris 調(diào)至pH7.3,,同上離心,,取上清,以0.45μm硝酸纖維素膜過(guò)濾,。 (3)收集濾出液過(guò)Sephadex G-200層析柱,,以0.01mol/L,pH6.8 的PB低溫洗脫,,0.3~0.5ml/min,,分部收集,并以紫外監(jiān)測(cè)儀280nm監(jiān)測(cè),。 (4)*峰以IgM為主,,第二峰為IgA,第三峰為IgG,,收集合并第二峰各管,,裝入透析袋中,。 (5)對(duì)0.01mol/L,pH7.5(含0.1mol/L NaCl)的PB透析4~6h,。 (6)過(guò)DEAE-Sephadex A-50柱,,以0.01mol/L,pH7.5(含0.1mol/L NaCl)的PB洗脫至OD 280nm< 0.02,。 (7)改用含0.25mol/L NaCl的PB洗脫,,分部收集,280nm測(cè)蛋白峰,,收集合并含蛋白的洗脫峰,,濃縮后置-20℃保存。 我司多種*抗體展示: 純化抗體 | | 品名 | 包裝 | 羊抗人 IgG | 1mg | 羊抗人 IgG | 10mg | 羊抗人 IgG | 100mg | 羊抗小鼠 IgG | 1mg | 羊抗小鼠 IgG | 10mg | 羊抗小鼠 IgG | 100mg | 羊抗兔 IgG | 1mg | 羊抗兔 IgG | 10mg | 羊抗兔 IgG | 100mg | 羊抗人 IgM | 1mg | 羊抗人 IgM | 10mg | 羊抗人 IgM | 100mg | 羊抗人 IgA | 1mg | 羊抗人 IgA | 10mg | 羊抗人白蛋白 | 1mg | 羊抗人白蛋白 | 10mg | 羊抗人纖維蛋白原 | 1mg | 羊抗人纖維蛋白原 | 10mg | 兔抗羊 IgG | 1mg | 兔抗羊 IgG | 10mg | 兔抗豬 IgG | 1mg | |