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蔗糖的測定方法
閱讀：6111 發(fā)布時間：2012-11-71．原理
樣品脫脂后，用水或乙醇提取,，提取液經(jīng)澄清處理以除去蛋白質(zhì)等雜質(zhì),，再用鹽酸進(jìn)行水解，使蔗糖轉(zhuǎn)化為還原糖,。然后按還原糖測定方法分別測定水解前后樣品液中還原糖含量,，兩者差值即為由蔗糖水解產(chǎn)生的還原糖量,，乘以一個換算系數(shù)即為蔗糖含量。
2．儀器
①25 mL古氏坩堝或G4垂融坩堝,。
②真空泵,。
③滴定管。
④水浴鍋,。
3．試劑
①6 tool·I,。1鹽酸溶液。
②5 mol·L叫氫氧化鈉溶液：稱取20 g氫氧化鈉加水溶解并稀釋至100 mL,。
③l tool·L1氫氧化鈉溶液：稱取4 g氫氧化鈉加水溶解并稀釋至100 mI,。
④費(fèi)林試劑甲液：稱取34．639 g硫酸銅（CuS（）4·5H20），加適量水溶解,，加人0．5 mI硫酸,，加水稀釋至500 mL，用精制石棉過濾,。
⑤費(fèi)林試劑乙液,；稱取173 g酒石酸鉀鈉和50 g氫氧化鈉，加適量水溶解并稀釋到500 mL,，用精制石棉過濾,，貯存于橡皮塞玻璃瓶中。
⑥精制石棉：取石棉先用3 tool·I,。叫鹽酸浸泡2～3 h,，用水洗凈，再用10％氫氧化鈉浸泡2～3 h,。傾去溶液,，再用堿性酒石酸銅乙液浸泡數(shù)小時，用水洗凈,，再以3 mol·L1鹽酸浸泡數(shù)小時,，用水洗至不呈酸性。加水振蕩,，使之成為微細(xì)的漿狀軟纖維,，用水浸泡并貯存于玻璃瓶中，即可用于填充古氏坩堝,。
⑦O．02 mol·I,。q高錳酸鉀標(biāo)準(zhǔn)溶液：稱取3．3 g高錳酸鉀溶于1 050 mL水中，緩緩煮沸20～30 min,，冷卻后于暗處密閉保存數(shù)日,，用垂融漏斗過濾，保存于棕色瓶中。標(biāo)定：稱取150～200℃干燥1～1．5 h的基準(zhǔn)草酸鈉約O．2 g,，溶于50 mI,。水中；加80 mI,。硫酸，用配制的高錳酸鉀溶液滴定,，接近終點(diǎn)時加熱至70℃,，繼續(xù)滴至溶液呈粉紅色30 s不褪為止。同時作空白試驗,。
⑧硫酸鐵溶液：稱取50 g硫酸鐵,，加人200 mL水溶解后加入i00 mL硫酸，冷卻后加水稀釋至1 000 mL,。
⑨3 tool·L叫鹽酸溶液：量取30 mI,。濃鹽酸，加水稀釋至120 mL,。
⑩甲基紅乙醇溶液（O．1％）：稱取0．1 g甲基紅,，用60％乙醇溶解并定容到100 mL。
4．操作步驟
①樣品處理
a．乳類,、乳制品及含蛋白質(zhì)的食品：稱取約0．5～2 g固體樣品（吸取2～10 mL液體樣品）,，置于250 mL容量瓶中，加50 mL水,，搖勻,。加入10 mL堿性酒石酸銅甲液、4 mLl tool·L叫NaOH溶液,，加水至刻度,，混勻。靜置30 rain,，用干燥濾紙過濾,，棄去初濾液，濾液備用,。（此步驟目的是沉淀蛋白質(zhì)）
b．酒精性飲料：吸取100 mL樣品,，置于蒸發(fā)皿中，用1 tool·L一,，NaOH溶液中和至中性,，在水浴上蒸發(fā)至原體積1／4后（注意保持溶液pH為中性），移人250 mL容量瓶中,。加50 mL水,，混勻。以下按a中從“加入10 mL堿性酒石酸銅甲液”起依次操作,。
c．含淀粉多的食品：稱取2～10 g樣品,，置于250 mL容量瓶中,，加200 mL水，在45℃水浴中加熱1 h,，并時時振搖（此步驟是使還原糖溶于水中,，切忌溫度過高，因為淀粉在高溫條件下會糊化,、水解,，影響測定結(jié)果）。冷卻后加水至刻度,，混勻,，靜置。吸取200 mL上清液于另一250 mL容量瓶中,，以下按a中從“加入10 mI,。堿性酒石酸銅甲液”起依次操作。
d．含有脂肪的食品：稱取2～10 g樣品,，先用乙迷或石油醚淋洗3次,，去除醚層。加入50mL水混勻,，以下按a中從“加入10 mL堿性酒石酸銅甲液”起依次操作,。
e．汽水等含有二氧化碳的飲料：吸取100 mL樣品置于蒸發(fā)皿中，在水浴上除去二氧化碳后,，移入250 mI一容量瓶中,，并用水洗滌蒸發(fā)皿，洗液并入容量瓶中,，再加水至刻度,，混勻后，備用,。
②樣品水解：吸取2份50 mI,。樣品處理液，置于100 mL錐形瓶中,，一份加5 mL 6 mL叫鹽酸,，在68~70℃中水解15 min（如果溫度過高或時間過長，一些大分子糖也會被水解）,。冷卻后加2滴甲基紅指示劑,，用5 tool·I．1氫氧化鈉溶液中和至中性，轉(zhuǎn)至容量瓶中,，加水定容至100 mL,，混勻，此液為樣品水解液。另一份直接加水稀釋至100 mL,，此液未水解,。
③樣品測定：分別吸取②中樣品水解液和直接加水稀釋的溶液各50 mL,，分別于兩個400mL燒杯中,，各加入25 mL堿性酒石酸銅甲液及25 mI。乙液,，于燒杯上蓋一表面皿,，加熱，控制在4 rain內(nèi)沸騰,，再準(zhǔn)確煮沸2 rain，趁熱用鋪好石棉的古氏坩堝或G,。垂融坩堝抽濾,，并用60℃熱水洗滌燒杯及沉淀，至洗液不呈堿性為止,。將古氏坩堝或垂融坩堝放回400 mL燒杯中,，加25 mL硫酸鐵溶液及25 mL水，用玻棒攪拌使氧化亞銅*溶解,，分別以0．1000tool·L_,。高錳酸鉀標(biāo)準(zhǔn)液滴定至微紅色為終點(diǎn)。同時吸取50 mL水,，加與測樣品時相同量的堿性酒石酸銅甲,、乙液，硫酸鐵溶液及水,，按同一方法做試劑空白實驗,。
5．計算
6．說明
①這里用的是高錳酸鉀滴定法測定還原糖，也可用直接滴定法測定還原糖,。
②蔗糖的水解條件遠(yuǎn)比其他雙糖的水解條件低,，在本方法規(guī)定的水解條件下，蔗糖可*水解,，而其他雙糖和淀粉等的水解作用很小,，可忽略不計。
③用還原糖法測定蔗糖時,，為減少誤差,，測得的還原糖含量應(yīng)以轉(zhuǎn)化糖表示。因此,，選用直接滴定法時,，應(yīng)采用0．1％標(biāo)準(zhǔn)轉(zhuǎn)化糖溶液標(biāo)定堿性酒石酸銅溶液。
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