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?凍融血清沉淀物是否會影響血清品質

閱讀:585          發(fā)布時間:2024-7-4

做細胞培養(yǎng)實驗經常會用到血清,,血清用不完我們會凍起來下次使用,。但相信大家也會發(fā)現在融化血清過程中會出現白色的沉淀物質,,就會疑惑這種情況是否是血清出現問題。

??首先呢我們要搞清楚血清中絮狀沉淀物是什么,,沉淀物包含纖維蛋白和脂蛋白,,這是正常特性,不會影響產品性質,。要除去沉淀,離心血清(400g,,1~2分鐘)或簡單的讓其沉淀在瓶子底部,,將血清小心的轉移到另一個無菌瓶里(一般不建議采用過濾的方法除去沉淀,因為沉淀會堵塞濾膜而無法過濾),。大多情況輕輕搖動沉淀并加熱至37℃就會再溶解,。所以,使用產品時要搖動并加熱血清至37℃,,沉淀會自然消失,。

 

(1)怎樣才能降低沉淀物的發(fā)生呢?

 

1. 解凍血清/分裝凍存時,,須規(guī)則搖晃均勻,,使溫度及成分均一,減少沉淀的發(fā)生,。

 

2. 勿將血清置于37℃太久,,否則血清會變得渾濁,同時血清中許多較不穩(wěn)定的成份也會因此受到破壞,,從而影響血清的品質,。

 

3. 血清的熱滅活非常容易造成沉淀物的增多,若非必要無須做此步驟,。

 

(2)使用時常見問題及解決方法:

 

一,、保存血清最-好的方法

 

??血清應保存在-5℃至-2O℃,若存放于4℃請勿超過一個月,。若無法一次用完一瓶,,建議將無菌分裝血清至恰當的滅菌容器內,再放回冷凍。

 

二,、如何解凍血清不會使產品質量受損

 

??將血清從冷凍箱取出后,,先置于2-8℃冰箱使之溶解,然后在室溫下使之全溶,。但必須注意的是,,溶解過程中必須規(guī)則地搖晃均勻。

 

三,、避免沉淀物的產生

 

1. 解凍血清時,,請按照所建議的逐步解凍法(-2O℃至4℃至室溫),若血清解凍時改變的溫度太大(如-20℃至37℃),,實驗顯示非常容易產生沉淀物,。

 

2. 解凍血清時,請隨時將之搖晃均勻,,使溫度及成分均一,,減少沉淀的發(fā)生

 

3. 請勿將血清置于37℃太久。若在37℃放置太久,,血清會變得混濁,,同時血清中許多較不穩(wěn)定的成分也會因此受到損害,而影響血清的質量,。

 

4. 血清的熱滅活非常容易造成沉淀物的增多,,若非必要無須做此步驟。

 

5. 若必須做血清的熱滅活,,請遵守56℃,,30分鐘的原則,并隨時搖晃均勻,。溫度過高,,時間過久或搖晃不均勻,都會造成沉淀物的增多,。

 

四,、如何處理血清解凍后有絮狀沉淀物出現

 

??想要去除這些絮狀沉淀物,可將血清分裝至無菌離心管內,,以400g稍微離心,,上清液即可接著加入培養(yǎng)基內一起過濾。但不建議以過濾的方法去除這些絮狀沉淀物,,因為它可能會阻塞過濾膜,。

 

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