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技術(shù)文章

ELISA加樣時(shí)如何避免氣泡的產(chǎn)生?

閱讀:2381          發(fā)布時(shí)間:2021-3-1

    相信大家在很多說明書或教科書上都看到過這樣的一條提示,,就是加樣時(shí)要避免出現(xiàn)氣泡,這到底是什么原因呢,?因?yàn)樵谧鰧?shí)驗(yàn)的過程中,,有時(shí)為了打干凈槍頭里面的液體,很容易產(chǎn)生氣泡,,這樣對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果會(huì)產(chǎn)生什么影響呢?

 
1.通常氣泡都是聚集在酶標(biāo)板的孔周圍,,導(dǎo)致孔中液體不能與孔壁有效接觸,使
2.孔內(nèi)反應(yīng)不均一,。
3.包被時(shí)有氣泡的話,,將導(dǎo)致包被不*實(shí)際包被量下降--弱陽性甚至假陰性。
4.封閉時(shí)有氣泡的話,,將導(dǎo)致大量未結(jié)合位點(diǎn)的存在,,引起非特異性結(jié)合--本底增高,假陽性,。
5.加樣時(shí)有氣泡的話,,抗原抗體不能有效的結(jié)合--弱陽性甚至假陰性。
6.加二抗時(shí)有氣泡的話,,抗原抗體不能有效的結(jié)合--弱陽性甚至假陰性(競爭法相反----假陽性),。
7.加顯色液時(shí)有氣泡的話---顯色不*。
8.加終止液時(shí)有氣泡的話(1,、不能*終止反應(yīng) 2,、影響酶標(biāo)儀比色,OD值增高)
9.洗滌時(shí)有氣泡的話,,非特異性結(jié)合物不能*洗去,,做無用功,。
 
避免方法:
1、加樣時(shí)盡量靠近孔底(不要接觸孔底),,用力均勻,,不要過快過猛。
2,、封閉時(shí)一定要加滿孔,,
3、洗滌時(shí)一定要加滿孔(重要),,氣泡會(huì)浮上來終驅(qū)除,。手工洗板時(shí)一定要吸干水分并用力拍干。
 
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