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ELISA實(shí)驗(yàn)誤差?恒遠(yuǎn)幫你減小誤差!
閱讀:1257 發(fā)布時(shí)間:2021-2-25細(xì)節(jié)決定成敗,在ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)操作中,,誤差分有系統(tǒng)誤差,、偶然誤差、過(guò)失誤差,,而一個(gè)小小的誤差主意能夠影響到實(shí)驗(yàn),,那么實(shí)驗(yàn)誤差概率如何縮小,?
①:檢驗(yàn)技師應(yīng)具備從事實(shí)驗(yàn)室操作的基本素質(zhì)和實(shí)踐經(jīng)驗(yàn),。能熟練操作實(shí)驗(yàn)儀器、器械,,具有一定總結(jié)和分析問(wèn)題的能力,,對(duì)實(shí)驗(yàn)中出現(xiàn)的意外情況能及時(shí)妥善解決。
②:使用校對(duì)過(guò)的微量移液器,,排除自然誤差,。移液器準(zhǔn)確與否對(duì)定量檢測(cè)尤為重要。
③:仔細(xì)閱讀說(shuō)明書,,嚴(yán)格按照說(shuō)明書要求進(jìn)行規(guī)范化操作,。不同批號(hào)的試劑不可混用。值得改進(jìn)的地方,,反復(fù)試驗(yàn)確定成立后才能改進(jìn),。
④:洗滌*,如若洗板不*,,酶結(jié)合物本底顯色會(huì)呈現(xiàn)假陽(yáng)性,。洗滌液要新鮮,現(xiàn)用現(xiàn)配,陳舊的洗滌液會(huì)出現(xiàn)本底增高現(xiàn)象,,也可能出現(xiàn)假陽(yáng)性,。
⑤:嚴(yán)控反應(yīng)時(shí)間,反應(yīng)時(shí)間過(guò)長(zhǎng),,酶失活,;反應(yīng)時(shí)間過(guò)短,酶結(jié)合物不能與血清中的微生物抗原抗體充分結(jié)合,,物結(jié)構(gòu)松散不牢固,容易洗掉,,都可能造成假陰性,。
⑥:注意試劑盒保存期,過(guò)保存期的試劑不能使用,。
⑦:評(píng)估試劑的實(shí)用性,,試劑的穩(wěn)定與否,對(duì)準(zhǔn)確率的高低到頭重要,。在試劑啟用前,,應(yīng)進(jìn)行陰、陽(yáng)對(duì)照及樣品反復(fù)比照試驗(yàn),,判定試劑符合要求后方可使用,。
⑧:嚴(yán)格掌握顯色時(shí)間,顯色時(shí)間過(guò)短,,加入終止液反應(yīng)終止后,,底物結(jié)合物的量過(guò)少,易出現(xiàn)假陰性,。超過(guò)顯色要求時(shí)間后顯色,,應(yīng)判為假陽(yáng)性,這可能與試劑本身有關(guān),。加顯色劑后立即顯色,,不可報(bào)陽(yáng)性,這可能是本底顯色的結(jié)果,。
⑨:加樣要準(zhǔn)確,、快速。如果加樣不準(zhǔn)確,,酶物的量不能確定,,直接影響顯色結(jié)果。顯色的深淺及A值的測(cè)定與加入顯色劑和終止液的量有關(guān),,所以加樣應(yīng)慎重,。要求在一定時(shí)間內(nèi)加樣完畢的實(shí)驗(yàn),如果加樣遲緩,便出現(xiàn)誤差,,而且試劑長(zhǎng)時(shí)間暴露在外,,尤其室溫過(guò)高時(shí),保存期會(huì)縮短甚至失效,。
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