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技術(shù)分享:ELISA試劑盒實驗小技巧
閱讀:937 發(fā)布時間:2021-2-24對于ELISA試劑盒實驗新手們來說,一場實驗下來還是有一定難度的,,那是因為他們還沒有掌握一些實驗中的小技巧,,掌握了實驗技巧之后,用ELISA試劑盒實驗會容易很多,。今天為大家分享的文章中包含了ELISA試劑盒實驗的要求,、方法等技術(shù)。新手小白們還不趕快收藏起來,!
1.加酶試劑后用吸水紙在酶標板表面輕拭吸干,。
2.合理安排檢測量,以免反應(yīng)板過多造成洗板等待時間長,。
3.吸取液體時,,要用量程和需要量接近的槍去吸,減少誤差,。
4.要盡量做雙孔實驗,,這樣才既能保證數(shù)據(jù)的準確性,又能反映出試劑盒的精密度,。
5.樣品稀釋液應(yīng)用加液器加注,,并經(jīng)常校對其準確性。
6.為防止樣品蒸發(fā),,試驗時將反應(yīng)板放于鋪有濕布的密閉盒內(nèi),,酶標板加上蓋或覆膜,。
7.未使用完的酶標板或者試劑,請于2-8℃保存,。辣根過氧化物酶標記抗人IgG工作液請依據(jù)所需的量配置使用,。請勿重復(fù)使用已稀釋過的辣根過氧化物酶標記抗人IgG工作液。
8.ELISA試劑盒實驗中,,加樣后及時放人孵箱,,標本較多時,要分批操作,。按說明步驟嚴格控制操作時間,,防止孵育時間人為延長,導(dǎo)致非特異性結(jié)合緊附于反應(yīng)孔周圍,,難以清洗*,。
9.剩余樣品及廢棄物應(yīng)經(jīng)121℃高壓蒸汽滅菌30分鐘,或用5.0g/L次氯酸鈉等消毒劑處理30分鐘后廢棄,。
10.人ELISA試劑盒洗滌時各孔均需加滿液體,,防止孔口有游離酶不能洗凈。
11.每次實驗留一孔作為空白調(diào)零孔,,該孔不加任何試劑,,只是后加底物溶液及2N H2SO4。測量時先用此孔調(diào)OD值至零,。
12.手工洗板時每次加入洗滌液后,。應(yīng)靜置15~30s,不要將一個酶標孑L中的洗滌液濺入另一酶標孔中,,防止交叉污染,。甩去洗滌液后將酶標板放在毛巾或吸水紙上拍干。
13.對樣本的結(jié)果有疑問時需要使用其他檢測方法進行驗證,。
14.沒有去離子水或雙蒸水時,,可以使用娃哈哈純凈水配制溶液,切勿使用自來水,。
15.在使用微量加樣器時,,吸取不同瓶子中液體后要更換槍頭,即使吸取標準品溶液,。
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