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檢測蛋白用WB實(shí)驗(yàn)還是ELISA實(shí)驗(yàn)好?它們有什么區(qū)別?
閱讀：3085 發(fā)布時(shí)間：2021-2-22檢測蛋白的實(shí)驗(yàn)有很多種,WB實(shí)驗(yàn)和ELISA實(shí)驗(yàn)是比較常用的兩種實(shí)驗(yàn)方法,這兩種方法哪一種的實(shí)驗(yàn)結(jié)果更為可靠呢?有些人說ELISA自己包被抗體的話會比較麻煩,，WB相比更加科學(xué),，容易被雜志接納,。但是血清中沒有內(nèi)參可以選擇,。是不是ELISA實(shí)驗(yàn)操作要簡單很多,，那么又如何來解決這樣的一個(gè)問題呢,？今天上海恒遠(yuǎn)來為您解答這個(gè)疑惑。
一,、WB和ELISA的敏感性有所區(qū)別,。雖然前者用ECL顯色敏感度可達(dá)pg級，但不同的樣品來源和抗體的質(zhì)量,，不能保證每次都到這個(gè)級別;而ELISA可以達(dá)到ng級,。也就是說ELISA更適于豐度低的蛋白檢測。而且由于ELISA檢測所用的樣品少,，也適用于樣品來源有限的蛋白濃度檢測,。
二、在定量方面,，ELISA一般用于定性,，定量也可， WB可以做到半定量,。
三,、ELISA不如WB的特異性好。
四、關(guān)于血清內(nèi)因子的檢測,，如果WB檢得出就不要用ELISA,。血清內(nèi)參的問題，在ELISA里也一樣存在,。操作來說ELISA當(dāng)然簡單,，但由于兩種方法各有優(yōu)點(diǎn)，不能全面相互代替,。
ELISA:
優(yōu)點(diǎn)：靈敏,，能夠定量（有標(biāo)準(zhǔn)品的情況下）
缺點(diǎn)：需要購買試劑盒（自己做試劑盒的話建議您放棄），價(jià)格昂貴（雙抗夾心法需要兩個(gè)抗體,，當(dāng)然貴?。倚枰懦訇栃约訇幮缘膯栴},，需要考慮的問題較多。此外就是發(fā)文章沒有圖片不太好看（呵呵,，自己的感覺）
WB：
優(yōu)點(diǎn)：試劑便宜,，認(rèn)同度高，發(fā)文章沒有問題,，如果用高靈敏度的發(fā)光試劑盒也可以達(dá)到非常高的靈敏度
缺點(diǎn)：操作步驟較多,，如果實(shí)驗(yàn)室沒有成熟的條件，想開展起來需要花一些功夫,，分子量很大（個(gè)人認(rèn)為>200kD）和很?。?lt;5kD）的目的蛋白比較麻煩。
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