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您的ELISA試劑盒實驗為什么會失敗?
閱讀：1022 發(fā)布時間：2021-2-19成功的實驗是一個循序漸進的過程,，影響ELISA實驗結(jié)果的因素有很多，只有一一的掌握了實驗的細節(jié),，才能購做出完美的實驗,。您可知您的ELISA試劑盒實驗為什么會失敗,？今天文章的內(nèi)容中,，小編將為您找找其中的原因。
第yi,、標本的影響
溶血標本及混有紅細胞的血清采用ELISA法檢測易產(chǎn)生假陽性,。可能是溶血血清中含有過氧化酶物質(zhì)（紅細胞或血紅蛋白中的亞鐵血紅素）,，在洗滌過程中往往難以*洗脫,，它可使H2O2釋放出原生態(tài)氧（O）,，從而催化底物四甲基聯(lián)苯胺可溶性的有色物質(zhì)，即顯藍色,，產(chǎn)生假陽性,。所以嚴重溶血標本禁用。
第二,、標本受細菌污染
因菌體中可能含有內(nèi)源性辣根過氧化物酶,，因此，被細菌污染的標本同溶血標本一樣,，亦可產(chǎn)生非特異性顯色而干擾測定結(jié)果,。
第三、標本保存不當
在冰箱中保存過久的標本,，在間接法ELISA測定中會導(dǎo)致本底過深,、造成假陽性；為克服上述干擾,，ELISA試劑盒測定的血清標本宜為新鮮采集,；如不能立即測定，5d內(nèi)測定的血清標本可存放于4
℃,，1周后測定的血清標本應(yīng)低溫凍存,；凍存后融解的標本，蛋白質(zhì)局部濃縮,，分布不均,，應(yīng)充分混合后再測定，但混勻時應(yīng)輕柔,，不可強烈振蕩,。
第四、標本凝固不全
在工作中,，有時為了爭取時間快速檢測,，常在血液還未開始凝固時即強行離心分離血清，使血清中仍殘留部分纖維蛋白原,，在ELISA測定過程中可以形成肉眼可見的纖維蛋白塊,，易造成假陽性結(jié)果；因此血液標本采集后必須使其充分凝固后再分離血清,。
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