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    人血清淀粉樣蛋白A（SAA）ELISA試劑盒試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附實驗（ELISA）。往預(yù)先包被人血清淀粉樣蛋白A（SAA）捕獲抗體的包被微孔中,，依次加入標(biāo)本、標(biāo)準(zhǔn)品,、HRP標(biāo)記的檢測抗體,，經(jīng)過溫育并*洗滌。用底物TMB顯色,，TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成終的黃色。顏色的深淺和樣品中的人血清淀粉樣蛋白A（SAA）呈正相關(guān),。用酶標(biāo)儀在450nm 波長下測定吸光度（OD 值）,，計算樣品濃度。

    人血清淀粉樣蛋白A（SAA）ELISA試劑盒標(biāo)本保存中的幾個問題：

    一,、標(biāo)本保存不當(dāng)

    在冰箱中保存過久的標(biāo)本,，血清中IgG可聚合成多聚體、AFP可形成二聚體,，在間接法ELISA測定中會導(dǎo)致本底過深,、甚至造成假陽性；標(biāo)本放置時間過長（如一天以上）,，有時抗原或抗體免疫活性減弱,，亦可出現(xiàn)假陰性。為克服上述干擾,，ELISA測定的血清標(biāo)本宜為新鮮采集,；如不能立即測定，5天內(nèi)測定的血清標(biāo)本可存放于4℃,，1周后測定的血清標(biāo)本應(yīng)低溫凍存,；凍存后融解的標(biāo)本，蛋白質(zhì)局部濃縮,，分布不均,，應(yīng)充分混合后再測定，但混勻時應(yīng)輕柔,，不可強(qiáng)烈振蕩,。

    二、標(biāo)本溶血

    由于各種人為原因引起的標(biāo)本溶血,，均可因紅細(xì)胞破壞溶解時釋放出大量具有過氧化物酶活性的血紅蛋白,，在以辣根過氧化物酶為標(biāo)記的ELISA測定中，會導(dǎo)致非特異性顯色,，ELISA試劑盒干擾測定結(jié)果,。為克服上述干擾作用,，標(biāo)本采集時必須注意避免溶血。

    三,、標(biāo)本凝集不全

    在沒有促凝劑和抗凝劑存在的情況下,，正常血液采集后1/2~2h開始凝固，18~24h*凝固,。臨床檢驗工作中,，有時為了爭取時間快速檢測，常在血液還未開始凝固時即強(qiáng)行離心分離血清,，此時的血清中仍殘留部分纖維蛋白原,，在ELISA測定過程中可以形成肉眼可見的纖維蛋白塊，易造成假陽性結(jié)果,；這類情況于次日復(fù)查時因血凝已*,，血清中不再有纖維蛋白原存在，故復(fù)查結(jié)果變?yōu)殛幮?。為避免上述干擾作用,，解決的辦法是血液標(biāo)本采集后必須使其充分凝固后再分離血清，或標(biāo)本采集時用帶分離膠的采血管或于采血管中加入適當(dāng)?shù)拇倌齽?/span>

    四,、標(biāo)本管中添加物質(zhì)的影響

    抗凝劑,、酶抑制劑及快速分離血清的分離膠等均對ELISA測定有一定干擾作用。

    五,、標(biāo)本受細(xì)菌污染

    因菌體中可能含有內(nèi)源性辣根過氧化物酶,，因此，被細(xì)菌污染的標(biāo)本同溶血標(biāo)本一樣,，亦可產(chǎn)生非特異性顯色而干擾測定結(jié)果,。