日韩av大片在线观看欧美成人不卡|午夜先锋看片|中国女人18毛片水多|免费xx高潮喷水|国产大片美女av|丰满老熟妇好大bbbbbbbbbbb|人妻上司四区|japanese人妻少妇乱中文|少妇做爰喷水高潮受不了|美女人妻被颜射的视频,亚洲国产精品久久艾草一,俄罗斯6一一11萝裸体自慰,午夜三级理论在线观看无码

    重組蛋白分為凍干粉和溶液態(tài)兩種保存形式,，原核細(xì)胞表達的重組蛋白為凍干粉狀態(tài),，真核細(xì)胞表達的重組蛋白為溶液態(tài)保存，這樣使得重組蛋白非常穩(wěn)定,，在-80℃條件下可保存數(shù)年,。凍干粉在使用前需進行溶解，其中溶解的方法非常關(guān)鍵,，因為溶解不好會降低蛋白的效用,。溶液態(tài)保存的重組蛋白在凍融稀釋使用過程中也需要仔細(xì)注意，這些都是用戶在實際應(yīng)用中經(jīng)常遇到的問題,。

    （1）原核細(xì)胞表達的重組蛋白,。大腸桿菌表達的凍干重組蛋白，已經(jīng)從包涵體中提純,，添加了蛋白保護劑,，使用過濾后的無菌水作為復(fù)溶劑即可，復(fù)溶凍干蛋白100μg,，用86μl的超純水,，輕輕搖晃使蛋白溶解，再用移液槍的槍頭輕吹幾下即可*溶解,，一定不能使用渦旋儀進行快速振蕩或劇烈搖晃。

    （2）真核細(xì)胞表達的重組蛋白,。有活性的蛋白質(zhì)不僅要轉(zhuǎn)錄和翻譯,，還要進行翻譯后的加工，使得蛋白質(zhì)的空間折疊方式維持正常,，所以重組蛋白必須在真核細(xì)胞中進行,，如哺乳動物細(xì)胞能夠識別和去除基因中的內(nèi)含子，對翻譯后的蛋白質(zhì)進行加工,，這樣表達的蛋白質(zhì)具有生物活性,。我們用溶液態(tài)來保存，保持了其良好的活性和穩(wěn)定性,。

    （3）重組蛋白的保護劑,。在凍干和儲存過程中常用的保護劑或穩(wěn)定劑有糖類,，多元醇，聚合物,，表面活性劑,，某些蛋白和氨基酸等。我們通常加8%（質(zhì)量比體積）的海藻糖和甘露醇作為凍干保護劑,。海藻糖可明顯阻止蛋白質(zhì)二級結(jié)構(gòu)改變以及凍干過程中蛋白質(zhì)的伸展和聚集,，甘露醇也是一種普遍應(yīng)用的凍干保護劑和填充劑