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如何解凍血清才不會使產(chǎn)品質(zhì)量受損
閱讀:874 發(fā)布時間:2019-9-4血清應(yīng)保存在-5℃至-20℃,。然而,若存放于4℃時,,請勿超過一個月。若您一次無法用完一瓶,,建議將無菌分裝血清至恰當(dāng)?shù)臏缇萜鲀?nèi),,再放回冷凍。那么,如何解凍血清才不會使產(chǎn)品質(zhì)量受損,?
將血清從冷凍箱取出后,,先置于2-8℃冰箱使之溶解,,然后在室溫下使之全溶。但必須注意的是,,溶解過程中必須規(guī)則地?fù)u晃均勻,。
避免產(chǎn)生沉淀物
1、解凍血清時,,請按照所建議的逐步解凍法(-2℃至4℃至室溫),,若血清解凍時改變的溫度太大(如-20℃至37℃,實(shí)驗(yàn)顯示非常容易產(chǎn)生沉淀物,。
2,、解凍血清時,請隨時將之搖晃均勻,,使溫度及成分均一,,減少沉淀的發(fā)生
3、請勿將血清置于37℃太久,。若在37℃放置太久,,血清會變得混濁,同時血清中許多較不穩(wěn)定的成分也會因此受到損害,,而影響血清的質(zhì)量,。
4、血清的熱滅活非常容易造成沉淀物的增多,,若非必要,,可以無須做此步驟。
5,、若必須做血清的熱滅活,,請遵守56℃,30分鐘的原則,,并且隨時搖晃均勻,。溫度過高,時間過久或搖晃不均勻,,都會造成沉淀物的增多,。 血清解凍后發(fā)現(xiàn)有絮狀沉淀物出現(xiàn),該如何處理? 欲去除這些絮狀沉淀物,,可以將血清分裝至無菌離心管內(nèi),,以400g稍微離心,上清液即可接著加入培養(yǎng)基內(nèi)一起過濾,。但不建議以過濾的方法去除這些絮狀沉淀物,,因?yàn)樗赡軙枞^濾膜。
何謂熱滅活
一般是以56℃,,30分鐘來處理已解凍的血清,,因?yàn)榇思訜岵襟E,,可以使補(bǔ)體去活化,而補(bǔ)體所參與的反應(yīng)有:溶細(xì)胞活性,,平滑肌的收縮,,肥大細(xì)胞和血小板組胺的釋放,增強(qiáng)吞噬作用,,淋巴細(xì)胞,、巨噬細(xì)胞的趨化和激活。
有必要做熱滅活嗎?
實(shí)驗(yàn)顯示,,經(jīng)過正確處理的熱滅活血清,,對大多數(shù)的細(xì)胞而言是不需要的。經(jīng)此處理過的血清對細(xì)胞的生長只有微小的促進(jìn),,或*沒有任何作用,,甚至通常因?yàn)楦邷靥幚碛绊懥搜宓馁|(zhì)量,而造成細(xì)胞生長速率的降低,。而經(jīng)過熱處理的血清,,沉淀物的形成會顯著的增多,這些沉淀物在倒立顯微鏡下觀察,,像是 "小黑點(diǎn)",,常常會讓研究者誤以為是血清遭受污染,而把血清放在37℃環(huán)境中,,又會使此沉淀物更增多,,使研究者誤認(rèn)為是微生物的分裂擴(kuò)增。
購買的時候注意詢問廠家是否是已滅活血清,。