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雙抗夾心法ELISA實(shí)驗(yàn)操作步驟
閱讀：2038 發(fā)布時(shí)間：2019-7-18上海恒遠(yuǎn)生物科技有限公司由資深專家?guī)ь^組建研發(fā)團(tuán)隊(duì),，十幾年ELISA試劑盒開發(fā)經(jīng)驗(yàn)，品質(zhì)保障,，值得信賴,；BIM品牌試劑盒更是度高，已被國內(nèi)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室廣泛使用,，如北京生命科學(xué)研究所,，中國科學(xué)院，協(xié)和醫(yī)科大學(xué)等,；諸多刊物的文章廣泛引用,，如Nature, PNAS, Cell Research, Biomaterials等，目前SCI文章及國內(nèi)核心期刊引用已達(dá)數(shù)百篇,。專業(yè)技術(shù)團(tuán)隊(duì)提供完備的售前及售后服務(wù),，確保您實(shí)驗(yàn)成功!我司來教您做實(shí)驗(yàn)有哪些步驟？
操作步驟：
1.|標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋與加樣：在酶標(biāo)包被板上設(shè)標(biāo)準(zhǔn)品孔10孔,，在第yi,、第二孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品100μl，然后在第yi,、第二孔中加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,，混勻；然后從第yi孔,、第二孔中各取100μl分別加到第三孔和第四孔,，再在第三、第四孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,，混勻,；然后在第三孔和第四孔中先各取50μl棄掉，再各取50μl分別加到第五,、第六孔中,，再在第五,、第六孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50ul，混勻,；混勻后從第五,、第六孔中各取50μl分別加到第七、第八孔中,，再在第七,、第八孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl，混勻后從第七,、第八孔中分別取50μl加到第九,、第十孔中，再在第九第十孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,，混勻后從第九第十孔中各取50μl棄掉,。（稀釋后各孔加樣量都為50μl，濃度分別為24μg/L ,，16μg/L,， 8μg/L，4μg/L,， 2μg/L）,。
2.加樣：分別設(shè)空白孔（空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑，其余各步操作相同）,、待測(cè)樣品孔,。在酶標(biāo)包被板上待測(cè)樣品孔中先加樣品稀釋液40μl，然后再加待測(cè)樣品10μl（樣品終稀釋度為5倍）,。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動(dòng)混勻,。
3.溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘,。
4.配液：將30（48T的20倍）倍濃縮洗滌液用蒸餾水30（48T的20倍）倍稀釋后備用。
5.洗滌：小心揭掉封板膜,，棄去液體,，甩干，每孔加滿洗滌液,，靜置30秒后棄去,，如此重復(fù)5次，拍干,。
6.加酶：每孔加入酶標(biāo)試劑50μl,，空白孔除外。
7.溫育：操作同3。
8.洗滌：操作同5,。
9.顯色：每孔先加入顯色劑A50μl,，再加入顯色劑B50μl，輕輕震蕩混勻,，37℃避光顯色15分鐘.
10.終止：每孔加終止液50μl,，終止反應(yīng)（此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色）。
11.測(cè)定：以空白空調(diào)零,，450nm波長依序測(cè)量各孔的吸光度（OD值）,。 測(cè)定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行。
上海恒遠(yuǎn)生物科技有限公司ELISA試劑盒均都經(jīng)過嚴(yán)格交叉反應(yīng)和干擾測(cè)試及穩(wěn)定性試驗(yàn),，作為一種分析檢測(cè)試劑,，具有反應(yīng)模式，可滿足廣泛的檢測(cè)需求,，新老客戶一致認(rèn)為質(zhì)量好,，價(jià)格低，是同類產(chǎn)品中的性價(jià)比,，讓您無后顧之憂,。我司秉承“信譽(yù)第yi、*yi,、品牌第yi、誠信為本"的理念,，以優(yōu)良的服務(wù)質(zhì)量和實(shí)惠的價(jià)格,，ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)前，請(qǐng)仔細(xì)閱讀中英文說明書,，我們提供免費(fèi)代測(cè),，實(shí)驗(yàn)過程指導(dǎo)服務(wù)，詳情咨詢上海恒遠(yuǎn)生物在線客服,。