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ELISA中抗原與抗體的認識
閱讀:1314 發(fā)布時間:2018-8-8 走進八月,你會看到八月的色彩如同陽光照耀著生命的幸福,,在田野上滾動,,拂動著嫩綠的禾苗,在天地間升騰,,映照著潔白的云朵,,疊映在忙碌的身影里,撫摩著耕耘的喜悅,,走進八月,,上海恒遠帶您知道知道ELISA中抗原與抗體的認識。
抗原是能在機體中引起特異性免疫應(yīng)答的物質(zhì),。小分子化合物在與大分子蛋白質(zhì)結(jié)合后能引起機體產(chǎn)生特異性抗體的,,稱為半抗原??乖M入機體后,,可刺激機體產(chǎn)生抗體和引起細胞免疫。例如某些激素,、藥物等,。能在機體中引起抗體產(chǎn)生的抗原多為分子量大于5000的蛋白質(zhì)。ELISA是一種免疫測定,。一個抗原分子可帶有不同的決定簇,。在免疫測定中,,抗原是指能與抗體結(jié)合的物質(zhì)。在臨床檢修中主要通過抗原抗體反應(yīng)檢測體液中的抗體或抗原性物質(zhì),??乖姆磻?yīng)性取決于抗原決定簇,是應(yīng)用免疫學(xué)技術(shù)測定標(biāo)本的方法,。
IgG和IgM的重鏈分別稱為γ(gamma)鏈和μ(mu)鏈,。抗體是能與抗原特異性結(jié)合的免疫球蛋白,。Ig的輕鏈?zhǔn)窍嗤?,?kappa;(kappa)和λ(Lambda)兩種型別。Ig分五類,,即IgG,、IgA、IgM,、IgD和IgE.與免疫測定有關(guān)的Ig主要為IgG和IgM.Ig由兩個輕鏈(L)和兩個重鏈(H)的單體組成,。五類Ig的重鏈結(jié)構(gòu)不同,這決定了它們的抗原性也不同,。
IgG可被木瓜蛋白酶分解為三個區(qū)段,,其中兩個相同的區(qū)段稱抗原結(jié)合片斷(Fab)。兩者構(gòu)成抗體的抗原結(jié)合部位,,只與相應(yīng)的抗原決定簇匹配,,發(fā)生特異性結(jié)合,是抗體專一性結(jié)合抗原的結(jié)構(gòu)礎(chǔ),。每個Fab都保留結(jié)合抗原的能力,,但只有一個抗原結(jié)合位點,是單價的,,與抗原結(jié)合后不泛起凝集或沉淀,另一區(qū)段稱Fc段,,無抗體活性,但具有IgG*的抗原性,。重鏈和輕鏈的N真?zhèn)€氨基酸排列順序因各種抗體而異,,稱為可變區(qū),分別用VH和VL表示,。
如將多種抗原或含有多個抗原決定簇的抗原注入機體,,則將由多系的B細胞產(chǎn)生相應(yīng)的多種抗體,些抗體均存在于免疫血清中,。含有抗體的血清稱為抗血清,。免疫測定中所用的抗血清一般用抗原免疫兔、羊或馬制得,。將免疫的脾細胞(含產(chǎn)生抗體的B細胞)與小鼠腫瘤細胞融合,,分離雜交瘤細胞,,接種于小鼠腹腔,產(chǎn)生的腹水中含有濃度很高的單克隆抗體,。每一系B細胞只產(chǎn)生針對某一抗原決定簇的抗體,。將單個雜交瘤細胞分離,在體內(nèi)或體外培養(yǎng)而分泌的抗體單克隆抗體,。單克隆抗體僅針對一種抗原決定簇,,具有很高的特異性。
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