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ELISA實驗抽取操作的技巧您竟然還不知道
閱讀：1806 發(fā)布時間：2018-3-8時值三月初,，再次一次迎來了ELISA科研實驗的高峰期,，歡迎各位朋友們資訊采購我司試劑盒產(chǎn)品，購我司ELISA試劑盒提供全程技術(shù)指導(dǎo)服務(wù)及代測,，為您的實驗帶來幫助及節(jié)省時間,。上海恒遠(yuǎn)生物每周都有技術(shù)分享給大家,，有需要了解的可以關(guān)注收藏我公司商鋪地址。
在ELISA實驗中,，洗滌是關(guān)鍵步驟之一,。而有一些參數(shù)會影響洗滌步驟的效果，這些參數(shù)包括吸液高度和吸入位置,，這兩者都能調(diào)整,，以降低背景(殘留量)和差異。下面我們就一起來看看今天的重點內(nèi)容,，上海恒遠(yuǎn)與您談?wù)fELISA抽吸的操作技巧,。
殘留液體中包含未結(jié)合的抗原或抗體，它們會增加背景信號,。殘留量越小,，殘留液體越少，轉(zhuǎn)移到下一步的干擾液體也就越少,。吸液高度會明顯影響殘留量,；如果洗滌吸頭與反應(yīng)孔底部的距離稍大，那就會讓殘留量急劇增加,。反之,，如果洗滌吸頭壓著反應(yīng)孔底部，那么也會使吸液效率降低,，殘留量增加,。
目前的洗板機一般使用兩種類型的洗頭：剛性和浮動的。浮動洗頭中的吸頭可在洗滌過程中自由上下移動,，而剛性洗頭則固定在適當(dāng)?shù)奈恢?。使用剛性洗頭的洗滌操作在優(yōu)化起來更為復(fù)雜，因為您需要非常仔細(xì)地調(diào)整吸液高度,。如果您們實驗室使用幾種不同的板,，那可能會很耗時。在使用浮動洗頭時,，吸頭會降到反應(yīng)孔的底部,。調(diào)整高度就不是很重要，因此洗頭會下降到底部,。
抽吸的位置也對殘留量有著重要影響,；如果每個孔只使用一個抽吸點(這很常見，因為更快),，那么抽吸的位置需要優(yōu)化,。*的位置取決于洗頭的性狀，但它幾乎不在反應(yīng)孔的中間，即使這是所有洗頭zui常見的默認(rèn)位置,。一般來說,，*位置在孔中間與孔壁之間的某處。
反應(yīng)孔的形狀也會影響殘留量,。C形底(平底圓角)的微孔板一般會比那些平底尖角的微孔板殘留量更低,。
如果沒有自動洗板機，采用手工洗滌,，那么也需要注意幾點。使用8道或12道微量移液器,，采用倒吸的方法進(jìn)行洗滌,；不同廠家的洗液不宜相互混用。洗板時需保證微孔板平放,，將洗滌液注滿各孔,，但盡量避免漏液，以每孔300 μl為宜,；板洗次數(shù)一般為3次,，要保證洗板的浸泡時間，每次浸泡時間一般為30-60 秒,；盡量減少洗液殘留量,，推薦每次洗板后進(jìn)行拍板，并及時更換吸水紙,，避免吸水紙的碎屑粘到反應(yīng)孔內(nèi),。
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