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影響ELISA試劑盒質(zhì)保的七大因素,！
閱讀：1070 發(fā)布時間：2016-9-26今日,，小編要為各位講解影響ELISA試劑盒質(zhì)保的七大因素！希望對您有所幫助,。
1.方法學的影響
ELISA測定模式包括以下幾種：雙抗體夾心法,、間接法、雙抗原夾心法,、IgM抗體捕捉法,、競爭抑制法，其中競爭抑制法(HBeAb,HBcAb等采用)因受操作時差所引起的不公平競爭等因素的影響,，結(jié)果重復(fù)性較差,，質(zhì)量較難控制,。
2.試劑因素
不同批次的ELISA試劑在制作過程中很難保證質(zhì)量*一致，即使是通過批批檢的項目其檢測結(jié)果也存在差異,，因此必須選擇和訂購長批號的試劑,，并保證保存條件。嚴格執(zhí)行這一標準可以避免因試劑批號改變而重新建立質(zhì)控體系及重新評估試劑的復(fù)雜過程,，并且能夠保證結(jié)果的穩(wěn)定性,；對于效期短、使用率低的試劑,，應(yīng)當小量分裝,，每次使用則取分裝部分即可，避免反復(fù)凍融造成試劑的失效,。
3.樣本因素
標本干擾因素包括內(nèi)源性干擾因素和外源性干擾因素,，前者包括類風濕因子、補體,、異嗜性抗體,、自身抗體、溶菌酶等,，后者包括標本溶血,、標本被細菌污染、標本貯存時間過長,、標本凝固不全,、冷凍標本的反復(fù)凍融等。
4.操作因素
ELISA操作步驟復(fù)雜,，操作不當將引起較大的誤差,。加樣、溫育,、洗滌,、顯色、比色,。
5.灰區(qū)的設(shè)置
通常情況下，ELISA定性實驗以“陽性”和“陰性”來報告結(jié)果,，兩者間有一條分界線被稱為“陽性判斷值”(cut-off value,，CO值)，這是定性免疫測定結(jié)果報告的依據(jù),。
6.標本復(fù)查
ELISA手工檢測過程復(fù)雜,，影響因素較多，即使室內(nèi)質(zhì)控在控,，也可能因孔間差異而造成結(jié)果的差異,，因此加大復(fù)查力度是保證結(jié)果準確性的可靠方法,，比如對HBsAg、HBeAg,、HCV-Ab,、HIV-Ab、TP-Ab等項目的可疑,、弱陽性標本及少見模式的檢測結(jié)果進行復(fù)查,。
7.常表示結(jié)果的常用方法
a.定性測定
b.半定量測定 結(jié)果一般以滴度表示。
c.定量測定 即用已知量的標準品作一系列稀釋后進行ELISA測定,，繪制標準曲線,，結(jié)果以量或單位表示。在ELISA定量檢測中每一塊反應(yīng)板都必須繪制相應(yīng)的標準曲線,。
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