zui近,，小貝家分別在北京和廣州舉辦了“細胞外囊泡專題研討班”，獲得老師和同學(xué)們熱情的參與,，有的甚至千里迢迢,、不遠*專程參加。

是什么引起大家如此高漲的參與熱情呢,？

當(dāng)前研究的熱點——外泌體,。

對于外泌體（又稱細胞外囊泡，Extracellular Vesicles）,，相信大家都不陌生,，它是指細胞膜上脫落或由細胞分泌的，具有雙層膜結(jié)構(gòu)囊泡狀異質(zhì)性群體，包括外泌體（Exs）,、膜微粒（MP）和微囊泡(EVs),。細胞外囊泡和細胞內(nèi)囊泡，有著相似的磷脂雙分子層結(jié)構(gòu),，包含有蛋白和核酸等生物大分子,，大小在40nm-1000nm，是細胞進行物質(zhì)運輸,、信號轉(zhuǎn)導(dǎo),、實現(xiàn)生理功能的重要工具。細胞外囊泡廣泛存在于細胞培養(yǎng)上清及各種體液,，參與細胞間通訊,、細胞遷移和免疫調(diào)節(jié)等多種反應(yīng)。囊泡水平升高與糖尿病,、艾滋病以及癌癥等疾病相關(guān),，有望成為這類疾病的診斷及評估疾病預(yù)后標(biāo)志物。如今,，越來越多的研究者開始著眼于對細胞外囊泡進行準(zhǔn)確的定型和定量研究,。2013年10月7日，諾貝爾生理學(xué)或醫(yī)學(xué)獎授予了發(fā)現(xiàn)細胞囊泡運輸調(diào)控機制的三位科學(xué)家,。
 

外周血中有著大量的外泌體,，來自不同的細胞。另外,，外泌體和腫瘤微環(huán)境,、腫瘤細胞遷移有著神秘。對于這些未知的領(lǐng)域,，目前還缺乏研究,，主要原因在于對于這種200nm以下顆粒的檢測，顯微鏡顯得力不從心,，電鏡又高不可及,。因此強大的工具和的解決方案的顯得尤其重要。

有鑒于此,，我們有幸邀請到了來自 Beth Israel Deaconess Medical Center and Harvard Medical School的Vasilis Toxavidis和John Tigges——兩位有著豐富的流式細胞術(shù)和外泌體研究經(jīng)驗的學(xué)者,，請他們和國內(nèi)的學(xué)者進行外泌體研究的交流，分享經(jīng)驗,。

8月24日,，首都北京，驕陽似火,，然而參加“貝克曼庫爾特細胞外囊泡專題研討班-北京站”活動的老師和同學(xué),，有著勝似驕陽的熱情,，有圖為證。現(xiàn)場不得不臨時加座,，才能滿足大家學(xué)習(xí)和交流的熱情,。
 

8月29日，羊城廣州,，驟雨初歇,，寒潮來襲，公路上隨處可見臺風(fēng)肆略的痕跡,，這些卻絲毫沒有阻擋來自全國各地的40多位老師的腳步,。大家齊聚中山大學(xué)，熱情參與我們廣州站的活動,。
 

兩場研討班,，早上均為報告部分。Vasilis Toxavidis和John Tigges從理論角度講述了外泌體檢測的問題,、誤區(qū)和解決方案；從散射光檢測原理,、流式細胞儀硬件,、再到樣本制備，系統(tǒng)的闡述了外泌體的檢測,，并以實例講述了心肌細胞源外泌體和紅細胞源外泌體的研究結(jié)果,，提出了Nano Flow Cytometry（NanoFACS）的概念。

首先,，來自美國哈佛干細胞研究所資源總監(jiān),、哈佛醫(yī)學(xué)院貝斯以色列女執(zhí)事醫(yī)療中心流式技術(shù)平臺負責(zé)人Vasilis Toxavidis先為大家做了流式分析EVs的技術(shù)原理、硬件可行性等方面的報告,。Vasilis以MoFloXDP和CytoFLEX為教學(xué)案例,，深入淺出地講解，時時博得與會者的掌聲,，給大家提供了流式在微顆粒檢測研究的新思路,。
 

隨后，美國哈佛醫(yī)學(xué)院貝斯以色列女執(zhí)事醫(yī)療中心外囊泡檢測中心主任John Tigges進一步介紹了利用流式細胞術(shù)研究細胞外囊泡,， 并結(jié)合HF患者EVs檢測案例,，抽絲剝繭，逐一分析如何解決細胞外囊泡檢測中問題,、缺陷,，闡述EVs在疾病研究中的實際意義，使大家茅塞頓開,。其幽默的演講風(fēng)格也深受老師們喜愛,，引得臺下提問連連,，將整個研討會推上了小高潮。
 

接著,，來自貝克曼庫爾特生命科學(xué)部的霍德華,，講述了貝克曼庫爾特的超高速離心機——Optima XPN在樣本制備和外泌體獲取方面的完整工作流程。超速離心分離,，是從生物體液和細胞培養(yǎng)樣品中分離純化外泌體的黃金標(biāo)準(zhǔn),，可以準(zhǔn)確地重復(fù)獲取外泌體，同時zui大限度減少蛋白質(zhì)聚集體和其他膜離子的共純化,。
 

上午的理論部分結(jié)束后,，大家對細胞外囊泡檢測，超離技術(shù)助力樣本采集和流式技術(shù)助力囊泡研究有了全面,、清晰,、深刻的認(rèn)識。

北京站的實驗操作部分,，在中科院過程工程研究所的,、陣容強大的三臺CytoFLEX流式細胞分析儀旁展開。John Tigges和Vasilis Toxavidis現(xiàn)場演示了如何在CytoFLEX上進行外泌體的檢測,。利用CytoFLEX的WDM技術(shù)和靈活的濾光片調(diào)整特點,，John Tigges輕松實現(xiàn)200nm以下的顆粒檢測，并找到外周血中神秘的外泌體,。

CytoFLEX使用VSSC檢測Megamix-Plus微球結(jié)果及線性表現(xiàn)：
 

CytoFLEX檢測血液中的細胞外囊泡結(jié)果：
 

由于FAPD的優(yōu)勢CytoFLEX對顆粒大小的檢測保持很好的線性,。出眾的分辨率不僅能將噪音與細胞外囊泡很好的分開，而且還可以對外囊泡群體進行細分,，分別研究其抗體表達情況,。
 

廣州站的實踐操作部分在中山大學(xué)北校區(qū)醫(yī)學(xué)院實驗室進行。大家在兩位美國專家的指導(dǎo)下,，領(lǐng)略了MoFlo Astrios EQ和CytoFLEX檢測細胞外囊泡的神奇魅力,。EVs的大小通常只有40nm-100nm，超出傳統(tǒng)流式的檢測范圍,。但MoFlo Astrios EQ的增強型雙前向角設(shè)計和CytoFLEX的雪崩光電二極管以超高的分辨率和靈敏度,，有效地區(qū)分噪音信號和檢測囊泡。連續(xù)五輪操作培訓(xùn),，讓操作者切身感受了一把迅速快捷,、多參數(shù)細胞外囊泡檢測。
 

兩場培訓(xùn)班內(nèi)容豐富,、實用,，而又易于理解。到會的老師和同學(xué)紛紛表示獲益匪淺,。貝克曼庫爾特的超高速離心機（Optima XPN）和超靈敏流式細胞儀（CytoFLEX）實現(xiàn)了雙劍合璧,，為科研工作者提供了且可行的外泌體檢測解決方案,。
 

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* 本產(chǎn)品僅用于科研，不用于臨床診斷,。
(此項活動得到中國科學(xué)院過程工程所和中山大學(xué)的大力協(xié)助,，特此表示感謝！)