1.大多數(shù)微生物可用超低溫保存,，超低溫保存法是適用范圍廣的微生物保存法：

 通?？捎贸蜏氐姆椒ū４妫ˋTCC 1983；Halliday,，Baker 1985）,。此法是將凍存在小管或安瓿里的細(xì)胞以較慢的冷凍速率（1℃／分鐘）冷凍，直至—150℃,，再將這些小管貯存在—150～－196℃的液氮中,。

   超低溫保藏的微生物必須始終貯存在溫度非常低的環(huán)境中，因此需要液氮罐,。

在長(zhǎng)期貯存的過(guò)程中必須經(jīng)常注意補(bǔ)充液氮,。這種貯存方式比凍干法需要更多的經(jīng)費(fèi)，包括為了維持貯存溫度所必要的勞動(dòng)力和液氮等,。
2 材料
  病毒超低溫保存所需材料有：熱收縮塑料管（Nunc Cryoflex）,，液氮罐，防護(hù)手套和面罩,，久性記號(hào)筆,，氣體噴燈，裝液氮的保溫瓶,。
3 方法
  （1）剪一段兩端各超出冷凍管長(zhǎng)度2cm 的熱收縮塑料管,。
  （2）將含有澄清病毒懸液（組織培養(yǎng)的上清培養(yǎng)基，或組織培養(yǎng)基內(nèi)的細(xì)胞溶解產(chǎn)物均可）冰浴幾分鐘,，用滅菌移液管將0.2ml 冰浴過(guò)的上清懸液分裝到冷凍管內(nèi),，并將蓋子擰緊。
  （3）將有病毒的冷凍管放入熱收縮塑料管中部,，插入正確的標(biāo)簽,。
  （4）用噴燈小心加熱熱收縮塑料管，并使之包住冷凍管,。注意不要用太高的溫度加熱熱收縮塑料管,。

  （5）再小心加熱熱收縮塑料管的兩端，用大號(hào)鑷子夾緊管的端口至*密封,。
  （6）將密封好的冷凍管快速在裝有液氮的保溫瓶中冷凍（操作時(shí)要求戴面罩和手套）,。
  （7）將冷凍過(guò)的冷凍管放入液氮罐中的格子內(nèi)，同時(shí)記錄樣品的詳細(xì)的存放位置,、實(shí)驗(yàn)編號(hào)和存放日期等,。
  （8）需要用時(shí),，迅速?gòu)囊旱迌?nèi)取出所需樣品，并投入37℃水浴箱中解凍后,，用解剖刀片在冷凍管的硅化墊圈處切開熱收縮塑料管,。擰開冷凍管的蓋子時(shí)不需要除去熱收縮塑料管。