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細胞凍存是將細胞放在低溫環(huán)境,，減少細胞代謝，以便長期儲存的一種技術,。細胞凍存是細胞保存的主要方法之一,，起到了細胞保種的作用。

 

細胞凍存技術作為一種保存細胞的有效方法,，在生物學領域已有深入廣泛的應用,。因為正常情況下，直接冷凍細胞會產生冰晶對細胞造成傷害,，從而導致細胞死亡,。所以需要通過添加冷凍保護劑配制細胞凍存液,，來保護細胞。

 

常用的細胞凍存液通常為胎牛血清中添加10％二甲基亞砜(DMSO),，二甲基亞砜(DMSO),，可以減少冰晶的形成，減輕自由基對細胞損害,，改變生物膜對電解質,、藥物、毒物和代謝產物的通透性,，可以很好地在細胞凍存過程中保護細胞,。

 

操作使用：

 

1、按照常用方法懸浮細胞或貼壁細胞收集于離心管中,。

 

2,、1000rpm-1500rpm，5min離心,，棄上清液,。

 

3、加入適量的Serum-Free細胞凍存液于離心管中,，推薦細胞凍存濃度為 1×106 - 1×107 cells/ml,。緩慢混合均勻，制成細胞懸液,。

 

4,、將離心管中的細胞混合液分裝于已標示*的冷凍保存管中。

 

5,、直接將凍存細胞放入-80℃冰箱,，24h后轉入移至-196℃液氮罐長期冷凍保存。