新生牛血清是一種旨在用于各種動(dòng)物細(xì)胞、胚胎細(xì)胞,、組織器官的培養(yǎng)以及細(xì)
胞融合和單抗制備等,。取自出生24小時(shí)之內(nèi)的新生牛,血清中含有各種血漿蛋白,、多肽,、脂肪、碳水化合物,、生長因子,、激素、無機(jī)物等,,這些物質(zhì)對促進(jìn)細(xì)胞生長或抑制生長活性是達(dá)到生理平衡的,。
在細(xì)胞培養(yǎng)過程中,應(yīng)該遇到過使用的新生牛血清系列產(chǎn)生沉淀的問題,,溶解后有沉淀,,往往還怕是染菌,即使不是染菌有些沉淀在細(xì)胞瓶內(nèi)也會(huì)影響生長,注意一些小的細(xì)節(jié)還是非常有必要的:
一般推薦在-20℃儲(chǔ)存新生牛血清系列,,避免反復(fù)凍融,。
解凍血清時(shí),請按照所建議的逐步解凍法(-20℃至4℃至室溫),,若血清解凍時(shí)改變的溫度太大(如-20℃至37℃),,非常容易產(chǎn)生沉淀物。
解凍血清時(shí),,請隨時(shí)將之搖晃均勻,,使溫度及成分均一,減少沉淀的發(fā)生,。
請勿將血清置于37℃太久,。若在37℃放置太久,血清會(huì)變得混濁,,同時(shí)血清中許多較不穩(wěn)定的成分也會(huì)因此受到損害,,而影響血清的質(zhì)量。
新生牛血清系列的熱滅活非常容易造成沉淀物的增多,,若非必要,,可以無須做此步驟。
若必須做血清的熱滅活,,請遵守56℃,,30分鐘的原則,并且隨時(shí)搖晃均勻,。
溫度過高,,時(shí)間過久或搖晃不均勻,都會(huì)造成沉淀物的增多,。
實(shí)驗(yàn)提示
1,、建議使用10%的新生牛血清用于常見細(xì)胞的體外培養(yǎng)
2、建議使用20%的新生牛血清用于人體正常細(xì)胞的體外培養(yǎng)
注意事項(xiàng)
1,、操作時(shí),,避免污染母液
2、操作時(shí),,須戴手套
3,、避免反復(fù)凍融
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