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中級(jí)會(huì)員·12年您現(xiàn)在的位置： 首頁(yè)> 公司動(dòng)態(tài)> ELISA實(shí)驗(yàn)中血清標(biāo)本注意事項(xiàng)五要點(diǎn)
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大部分elisa 檢測(cè)均以血清為標(biāo)本,，那么在ELISA實(shí)驗(yàn)過(guò)程中血清標(biāo)本有哪些注意事項(xiàng)呢？
具體注意事項(xiàng)：
1,、要注意避免出現(xiàn)嚴(yán)重溶血,。血紅蛋白中含有血紅素基團(tuán)，其有類(lèi)似過(guò)氧化物的活性,，因此,，在以HRP為標(biāo)記酶的ELISA測(cè)定中，如血清標(biāo)本中血紅蛋白濃度較高,，則其就很容易在溫育過(guò)程中吸附于固相,，從而與后面加入的HRP底物反應(yīng)顯色。
2,、樣本的采集及血清分離中要注意盡量避免細(xì)菌污染,，一則細(xì)菌的生長(zhǎng)，其所分泌的一些酶可能會(huì)對(duì)抗原抗體等蛋白產(chǎn)生分解作用;二則一些細(xì)菌的內(nèi)源性酶如大腸桿菌的β-半乳糖苷酶本身會(huì)對(duì)用相應(yīng)酶作標(biāo)記的測(cè)定方法產(chǎn)生非特異性干擾,。
3,、血清標(biāo)本如是以無(wú)菌操作分離，則可以在2～8℃下保存一周,，如為有菌操作,，則建議冰凍保存。樣本的長(zhǎng)時(shí)間保存,，應(yīng)在-70℃以下,。
4、冰凍保存的血清標(biāo)本須注意避免因停電等造成的反復(fù)凍融,。標(biāo)本的反復(fù)凍融所產(chǎn)生的機(jī)械剪切力將對(duì)標(biāo)本中的蛋白等分子產(chǎn)生破壞作用,，從而引起假陰性結(jié)果。此外,，凍融標(biāo)本的混勻亦應(yīng)注意,，不要進(jìn)行劇烈振蕩，反復(fù)顛倒混勻即可,。
5,、標(biāo)本在保存中如出現(xiàn)細(xì)菌污染所致的混濁或絮狀物時(shí),，應(yīng)離心沉淀后取上清檢測(cè)。
