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對(duì)細(xì)胞體外培育的二氧化碳培養(yǎng)箱加熱方法以及注意事項(xiàng)

閱讀:1015        發(fā)布時(shí)間:2014-3-27
  對(duì)細(xì)胞體外培育的二氧化碳培養(yǎng)箱加熱方法以及注意事項(xiàng) 
  二氧化碳培養(yǎng)箱是經(jīng)過(guò)在培養(yǎng)箱箱體內(nèi)模仿構(gòu)成一個(gè)相似細(xì)胞/安排在生物體內(nèi)的成長(zhǎng)環(huán)境,,培養(yǎng)箱需求安穩(wěn)的溫度(37°C),、安穩(wěn)的CO2水平(5%),、安穩(wěn)的酸堿度(pH值:7.2-7.4),、較高的相對(duì)飽和濕度(95%),,來(lái)對(duì)細(xì)胞/安排進(jìn)行體外培育的一種設(shè)備,。
  二氧化碳培養(yǎng)箱是經(jīng)過(guò)在培養(yǎng)箱箱體內(nèi)模仿構(gòu)成一個(gè)相似細(xì)胞/安排在生物體內(nèi)的成長(zhǎng)環(huán)境,,如安穩(wěn)的溫度(37°C),、安穩(wěn)的CO2水平(5%),、安穩(wěn)的酸堿度(pH值:7.2-7.4)、較高的相對(duì)飽和濕度(95%),,來(lái)對(duì)細(xì)胞/安排進(jìn)行體外培育的一種設(shè)備,。
  二氧化碳培養(yǎng)箱運(yùn)用規(guī)模
  其廣泛運(yùn)用于細(xì)胞、安排培育和某些格外微生物的培育,,常見(jiàn)于細(xì)胞動(dòng)力學(xué)研討,、哺乳動(dòng)物細(xì)胞分泌物的搜集、各種物理,、化學(xué)要素的致癌或毒理效應(yīng),、抗原的研討和出產(chǎn)、培育雜交瘤細(xì)胞出產(chǎn)抗體、體外授精(IVF),、干細(xì)胞,、安排工程、藥物挑選等研討范疇,。
  用戶的需求
  用戶對(duì)二氧化碳培養(yǎng)箱都有兩條zui基本的需求:
  一是需求二氧化碳培養(yǎng)箱能夠?qū)囟?、二氧化碳濃度和濕度供給zui安穩(wěn)的操控,以便于其研討作業(yè)的發(fā)展,;
  二是需求二氧化碳培養(yǎng)箱能夠?qū)ε囵B(yǎng)箱內(nèi)的微生物污染進(jìn)行有用的防備,,并且能夠守時(shí)消除污染,以維護(hù)研討成果,,避免樣品丟失,。
  二氧化碳培養(yǎng)箱微處置操控體系  
  微處置操控體系是堅(jiān)持培養(yǎng)箱內(nèi)溫度、濕度和CO2 濃度穩(wěn)態(tài)的操作體系,。微處置操控體系和其它各種功用附件(如高低溫主動(dòng)調(diào)理和警報(bào)設(shè)備,、CO2警報(bào)設(shè)備、密碼維護(hù)設(shè)置等)的運(yùn)用,,使得二氧化碳培養(yǎng)箱的操作和操控都十分的簡(jiǎn)潔,。
  如:LEEC 的PID 微處置器觸摸屏操控體系,它能嚴(yán)格操控氣體的濃度并將其損耗降低水平,,以確保培育環(huán)境安穩(wěn)不變,,且能確保長(zhǎng)期培育進(jìn)程中箱內(nèi)溫度,并有液晶顯現(xiàn),,圖形化進(jìn)程監(jiān)控,、干涉事情記載等。此外報(bào)警體系也是不行少,,它能讓你及時(shí)曉得培養(yǎng)箱呈現(xiàn)的情況,,并做出反響,然后zui大極限地降低了丟失,,確保實(shí)驗(yàn)的接連性,。有些培養(yǎng)箱有聲/光報(bào)警設(shè)備,溫度改動(dòng)達(dá)±0.5℃,,或CO2 濃度改動(dòng)達(dá)±5%時(shí),,即會(huì)主動(dòng)報(bào)警;有些具有CO2 濃度反常報(bào)警顯現(xiàn)功用,;有些具有低壓,、斷電報(bào)警功用。這些設(shè)備都是為了便利運(yùn)用者,,以削減繁瑣單調(diào)的實(shí)驗(yàn)進(jìn)程而規(guī)劃的,。
  二氧化碳培養(yǎng)箱加熱方法  
  氣套式加熱和水套式加熱,兩種加熱體系都是和牢靠的,一起它們都有著各自的長(zhǎng)處和缺陷,。
  水套式加熱
  水套式加熱是經(jīng)過(guò)一個(gè)獨(dú)立的水套層圍住內(nèi)部的箱體來(lái)堅(jiān)持溫度安穩(wěn)的,,其長(zhǎng)處:水是一種*的絕熱物質(zhì),當(dāng)遇到斷電的時(shí)分,,水套式體系就能夠?qū)Ρ乳L(zhǎng)期的堅(jiān)持培養(yǎng)箱內(nèi)的溫度性和安穩(wěn)性,,有利于實(shí)驗(yàn)環(huán)境不太安穩(wěn)(如有用電約束或常常停電)的用戶選用。
  氣套式加熱是經(jīng)過(guò)遍及箱體氣套層內(nèi)的加熱器直接對(duì)內(nèi)箱體進(jìn)行加熱的,,又名六面直接加熱,。
  氣套式與水套式對(duì)比,具有加熱快,,溫度的康復(fù)比水套式培養(yǎng)箱敏捷的特色,,格外有利于短期培育以及需求箱門(mén)頻頻開(kāi)關(guān)取放樣的培育,。此外,,關(guān)于運(yùn)用者來(lái)說(shuō)氣套式規(guī)劃比水套式更簡(jiǎn)略化(水套式需求對(duì)水箱進(jìn)行加水、清空和清潔,,并要常常監(jiān)控水箱運(yùn)作的情況,,還有潛在的污染危險(xiǎn))。
  三氣培養(yǎng)箱是一臺(tái)新式的高氧培養(yǎng)箱,,它的首要技能參數(shù)為:
  1. 控溫規(guī)模 室溫 +3℃~45℃(例:室溫25℃,,則控溫規(guī)模為28℃~70℃)
  2. 恒溫操控精度 ±0.2℃
  3. 溫度均勻性±0.2℃
  4. O2濃度操控規(guī)模1%--50%(可抵達(dá)98%)(N2濃度=100%—CO2濃度—O2濃度)
  5. O2濃度操控精度 0~5%時(shí)為±0.2%,5%~20%時(shí)為±0.3%
  6. CO2濃度操控規(guī)模 0%--20%
  7. CO2濃度操控精度 0~5%時(shí)為±0.2%,,5%~20%時(shí)為±0.3%
  8. 電源 220V 50HZ
  9. 功率 小于450W
  10. O2濃度正常下降至置定值的時(shí)刻小于10分鐘(O2濃度為1%時(shí))
  11. CO2濃度正常上升至置定值的時(shí)刻小于10分鐘(CO2濃度為5%時(shí))
二氧化碳培養(yǎng)箱
  二氧化碳培養(yǎng)箱二氧化碳濃度操控  
  二氧化碳濃度能夠經(jīng)過(guò)紅外傳感器(IR)或熱導(dǎo)傳感器(TC)進(jìn)行丈量,。兩種傳感器各有優(yōu)缺陷。
  熱導(dǎo)傳感器
  熱導(dǎo)傳感器監(jiān)控CO2濃度的作業(yè)原理是根據(jù)對(duì)內(nèi)腔空氣熱導(dǎo)率的接連丈量,,輸入CO2氣體的低熱導(dǎo)率會(huì)使腔內(nèi)空氣的熱導(dǎo)率發(fā)作改動(dòng),,這樣就會(huì)發(fā)作一個(gè)與CO2濃度直接成正比的電信號(hào)。
  TC操控體系的一個(gè)缺陷即是箱內(nèi)溫度和相對(duì)濕度的改動(dòng)會(huì)影響傳感器的度,。當(dāng)箱門(mén)被頻頻翻開(kāi)時(shí),,不只CO2濃度,溫度和相對(duì)濕度也會(huì)發(fā)作很大的動(dòng)搖,,因而影響了TC傳感器的精度,。當(dāng)需求的培育條件和頻頻敞開(kāi)培養(yǎng)箱門(mén)時(shí),此操控體系就顯得不太適用了,。
  紅外傳感器
  紅外傳感器(IR)它是經(jīng)過(guò)一個(gè)光學(xué)傳感器來(lái)檢測(cè)CO2水平的,。IR體系包含一個(gè)紅外發(fā)射器和一個(gè)傳感器,當(dāng)箱體內(nèi)的CO2吸收了發(fā)射器發(fā)射的有些紅外線之后,,傳感器就能夠檢測(cè)出紅外線的削減量,,而被吸收紅外線的量正巧對(duì)應(yīng)于箱體內(nèi)CO2的水平,然后能夠得出箱體內(nèi)CO2的濃度。由于IR體系是經(jīng)過(guò)紅外線削減來(lái)斷定箱內(nèi)CO2濃度,,而箱體內(nèi)顆粒物能夠反射或有些吸收紅外線,,使得IR體系對(duì)箱體內(nèi)顆粒物的多少對(duì)比靈敏,IR傳感器運(yùn)用在進(jìn)氣口具有HEPA空氣過(guò)濾器的培養(yǎng)箱較適宜,。
  二氧化碳培養(yǎng)箱相對(duì)濕度  
  箱內(nèi)濕度關(guān)于培育作業(yè)來(lái)說(shuō)是一項(xiàng)十分重要但是又常常被疏忽的要素,。堅(jiān)持滿意的濕度水平并且要有滿意快的濕度康復(fù)速度(如在開(kāi)關(guān)門(mén)后)才干確保不會(huì)由于過(guò)度枯燥而致使培育失利。
  當(dāng)前大多數(shù)的二氧化碳培養(yǎng)箱是經(jīng)過(guò)增濕盤(pán)的蒸騰作用發(fā)作濕氣的(其發(fā)作的相對(duì)濕度水平可達(dá)95%左右,,但開(kāi)門(mén)后濕度康復(fù)速度很慢),。盡量挑選濕度蒸騰面積大的培養(yǎng)箱,由于濕度蒸騰面積越大,,越簡(jiǎn)略抵達(dá)zui大相對(duì)飽和濕度并且開(kāi)關(guān)門(mén)后的濕度康復(fù)的時(shí)刻越短,。
  二氧化碳培養(yǎng)箱
  二氧化碳培養(yǎng)箱
  二氧化碳培養(yǎng)箱污染物的操控  
  污染是致使細(xì)胞培育失利的一個(gè)首要要素,二氧化碳培養(yǎng)箱的制造商們規(guī)劃了多種不一樣的設(shè)備去削減和避免污染的發(fā)作,,其首要路徑都是盡量削減微生物能夠成長(zhǎng)的區(qū)域和外表,,并主動(dòng)掃除污染設(shè)備來(lái)有用避免污染的發(fā)作。
  例如,,鑒于CO2培養(yǎng)箱在運(yùn)用進(jìn)程中有時(shí)會(huì)伴有霉菌成長(zhǎng),,為確保培養(yǎng)箱免受污染且確保儀器箱體內(nèi)的生物清潔性,有些公司開(kāi)發(fā)規(guī)劃了帶有紫外消毒功用的CO2培養(yǎng)箱,;還有公司規(guī)劃HEPA濾器能過(guò)濾培養(yǎng)箱內(nèi)空氣,,可過(guò)濾除掉99.97%的0.3um以上的顆粒;此外,,主動(dòng)高溫?zé)峥諝鉁缇O(shè)備能使箱內(nèi)溫度抵達(dá)高溫(如200℃)然后殺死一切污染微生物,,乃至芽孢等耐高溫微生物,這些設(shè)備關(guān)于細(xì)胞培育來(lái)說(shuō)是更有安全確保的,。
 二氧化碳培養(yǎng)箱運(yùn)用注意事項(xiàng) 
  1,、二氧化碳培養(yǎng)箱未注水前不能翻開(kāi)電源開(kāi)關(guān),否則會(huì)損壞加熱元件,。
  2,、培養(yǎng)箱運(yùn)轉(zhuǎn)數(shù)月后,,水箱內(nèi)的水因蒸騰能夠削減,,當(dāng)?shù)退恢甘緹?WLow12)亮?xí)r應(yīng)彌補(bǔ)加水。先翻開(kāi)溢水管,,用漏斗接橡膠管從注水孔彌補(bǔ)加水使低水位指示燈平息,,再計(jì)量彌補(bǔ)加水(CP-ST200A加水1800ml,CP-ST100A加水1200ml),,然后阻塞溢水孔,。
  3,、二氧化碳培養(yǎng)箱能夠做高精度恒溫培養(yǎng)箱運(yùn)用,這時(shí)須封閉CO2操控體系,。
  4,、由于CO2傳感器是在飽和濕度下校對(duì)的,因而加濕盤(pán)有必要時(shí)刻裝有滅菌水,。
  5,、當(dāng)顯現(xiàn)溫度超越置定溫度1℃時(shí),超溫報(bào)警指示燈(OverTemp7)亮,,并發(fā)出尖利報(bào)警聲,,這時(shí)應(yīng)封閉電源30分鐘;若再翻開(kāi)電源(溫控)開(kāi)關(guān)(Power20)依然超溫,,則應(yīng)封閉電源并報(bào)修理人員,。
  6、鋼瓶壓力低于0.2MPa時(shí)應(yīng)替換鋼瓶,。
  7,、盡量削減翻開(kāi)玻璃門(mén)的時(shí)刻。
  8,、假如二氧化碳培養(yǎng)箱長(zhǎng)期不必,,封閉前有必要鏟除作業(yè)室內(nèi)水分,,翻開(kāi)玻璃門(mén)通風(fēng)24小時(shí)后再封閉,。
  9、清潔二氧化碳培養(yǎng)箱作業(yè)室時(shí),,不要磕碰傳感器和拌和電機(jī)風(fēng)輪等部件,。
  10、拆裝作業(yè)室內(nèi)支架護(hù)罩,,有必要運(yùn)用隨機(jī)扳手,,不得過(guò)度用力。
  11,、轉(zhuǎn)移培養(yǎng)箱前有必要掃除箱體內(nèi)的水,。排水時(shí),將橡膠管緊套在出水孔上,,使管口低于儀器,,悄悄吸一口,放下水管,,水即虹吸流出,。
  12、轉(zhuǎn)移二氧化碳培養(yǎng)箱前應(yīng)拿出作業(yè)室內(nèi)的擱板和加濕盤(pán),,避免磕碰損壞玻璃門(mén),。
  13,、轉(zhuǎn)移培養(yǎng)箱時(shí)不能倒置,一起必定不要抬箱門(mén),,避免門(mén)變形,。

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