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聯(lián)系人：楊永漢
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商鋪：http://sorrent.com.cn/st199246/
【產品簡介】
（我司同時有登革熱,，克錐蟲，絲蟲,，非洲錐蟲,，恙蟲，無形體,，立次克體，基孔肯熱,，寨卡病毒,，黃熱病檢測試劑盒，各種質控品,，抗原,，）
【詳細說明】
豬流感病毒H3N2核酸檢測試劑盒
（我司同時有登革熱，克錐蟲,，絲蟲,，非洲錐蟲，恙蟲,，無形體,，立次克體,，基孔肯熱，寨卡病毒,，黃熱病檢測試劑盒,，各種質控品，抗原,，）
【產品名稱】
通用名稱：豬流感病毒H3N2核酸檢測試劑盒
英文名稱：Detection Kit for Avian Influenza Virus Subtype H5 RNA (PCR-Fluorescence Probing)
【包裝規(guī)格】大包裝,，24 反應/盒；大包裝,，48 反應/盒
需自備的試劑：核酸提取試劑
質控品說明：陽性質控品為含目的片段的重組質粒,，使用時無需進行核酸提取。
【儲存條件及有效期】
試劑盒保存于-20±5℃,，有效期 9 個月,。
試劑盒在 37℃可保存72h；試劑在 4℃可保存7天,；避免反復凍融,，反復凍融次數不超過 7 次；試劑開瓶次數不超過 7 次,。運輸采用干冰保持低溫,，運輸時間不應超過 3 天。試劑盒生產日期見產品標簽,。
【適用儀器】ABI 7500,、ABI 7300、LightCycler480 等熒光定量 PCR 儀,。
【樣本要求】
- 適用樣本類型：咽喉拭子,、泄殖腔拭子、肌肉或臟器樣本等,。
- 樣品采集與前處理（注意無菌操作）
- 活禽樣品——取咽喉拭子和泄殖腔拭子,，或新鮮糞便拭子，具體采集方法如下：·咽喉拭子,，采取時要將拭子深入喉頭及上腭裂來回刮3～5次,，取咽喉分泌液；·取泄殖腔拭子時,，將拭子深入泄殖腔轉一圈沾取糞便,；對于易造成損傷的小珍禽，直接用拭子沾取適量新鮮糞便,；·將咽喉拭子和泄殖腔拭子一起放入盛有1.0ml PBS的Eppendoff管中,，編號備用。
- 內臟或肌肉樣品——用無菌鑷剪夾取待檢樣品2.0g于研缽中充分研磨,，再加10mlPBS混勻,，或置于組織勻漿器中,，加入10mlPBS勻漿，然后將組織懸液轉入無菌Eppendoff管中3,000 rpm離心10 min,，取上清液轉入Eppendoff管中,，編號備用。
3. 保存與運送
請遵循目前的流感標本采集方案以及標準的流感標本儲存,、包裝和運送標準和相應的航空運輸協(xié)會的規(guī)定,。
【檢驗方法】
1.樣本處理和核酸提取（樣本處理區(qū)）
建議取 200μl 液態(tài)樣本進行核酸提??；組織樣本可以研磨液進行提取操作?？刹捎猛ㄓ玫暮怂崽崛≡噭┖?，請按照試劑盒說明書進行操作；也可選擇其他合適的商業(yè)化產品,。
本試劑盒中的陰性質控品參與提取,，用于對環(huán)境進行監(jiān)控；AIV H5 陽性質控品不參與提取,，用于 PCR 檢測試劑的質控,。
3.3 LightCycler480 儀器設置
- 點擊軟件主界面的“New Experiment”,進入程序設定界面。
檢測模式設置：從 Detection Format 的下拉框中選擇分析模式：Multi Color Hydrolysis Probe,“Customizes”模塊中選擇 483-533 濾片組合,，“Block Type”為儀器自動檢測,， “Plate ID”可手工輸入或掃描儀掃描，“Reaction Volume”設定為 25ul,。
- 循環(huán)參數：定義 PCR 程序中每個步驟（Program Name）及循環(huán)數(Cycles)和分析模式(Analysis Mode),利用“+”和“-”增加或刪除步驟,，擴增參數如下
50℃ 15 分鐘，1 個循環(huán),；
95℃ 15 分鐘,，1 個循環(huán)；
94℃ 15 秒* 58℃ 45 秒,，40 個循環(huán),；（此步采集熒光信號：“Analysis Mode”選擇“Quantification”,“Acquisition Mode”選擇“Single”）
40℃ 10 秒，1 個循環(huán),；
- 填樣品表：點擊“SampleEditor”模塊，進入樣本信息編輯界面,，在“SelectWorkflow”中選擇“AbsQuant”,在“SampleName”
列中定義樣本名稱,在“Sample Type”欄中選定樣品類型：陰性質控品選 NTC,；未知樣品選 Unknown。
- 運行程序：點擊“Experiment”模塊,，回到程序設定界面,，點擊窗口右下方的“StartRun”,彈出結果保存窗口,，輸入文件名和路徑后進入程序運行界面。
4. 結果分析
4.1 反應結束后保存檢測數據文件,。
4.2 分析條件設置：根據分析后圖像調節(jié) Baseline 的 start 值,、stop 值以及 Threshold 的 Value 值（用戶可根據實際情況自行調整， Start 值可以在 3～15,、End 值可設在 5～20,，調整陰性對照的擴增曲線平直或低于閾值線），點擊 Analysis 自動獲得分析結果,，在 Report 界面察看結果,。
4.質量控制
陰性質控品：擴增曲線無對數增長期；陽性質控品：擴增曲線有明顯對數增長期,，且 Ct 值≤32,；
以上要求需在同一次實驗中同時滿足，否則,，本次實驗無效,，需重新進行。
5.結果判定
1. 如果檢測樣品的擴增曲線無對數增長期或 Ct 值＞38,，可判樣品為禽流感 H5 亞型陰性,；
2. 如果檢測樣品 Ct 值≤38，且曲線有明顯的對數增長期,，可判樣品為禽流感 H5 亞型陽性,。
【檢測方法的局限性】
樣本檢測結果和樣本收集、處理,、運送及保存質量有關,，其中任何失誤都將會導致假陰性結果。如果樣本處理時沒有控制好交叉污染,，可能出現(xiàn)假陽性結果,。
【產品性能指標】
根據產品分析性能評估結果，本試劑盒的靈敏度為 1.0×103copies/ml,。與感染部位相同或感染癥狀相似的其他病原體（副流感病毒,、新城疫病毒、呼吸道合胞病毒,、腺病毒等）無交叉反應,。
【注意事項】
1.本產品僅用于體外診斷；
2.實驗室管理應嚴格按照 PCR 基因擴增實驗室的管理規(guī)范,，實驗人員必須進行專業(yè)培訓,，實驗過程嚴格分區(qū) 進行（試劑準備區(qū)、標本制備區(qū)、擴增和產物分析區(qū)）,，所用消耗品應滅菌后一次性使用,，實驗操作的每個 階段使用的儀器和設備，各區(qū)各階段用品不能交叉使用,；
3.為試劑和標本準備階段提供生物安全柜,，實驗過程中穿工作服，帶一次性手套,，使用自卸管移液器,；
4.試劑使用前要*解凍，8,000rpm 離心數秒后使用,；
5.標本制備區(qū)所用過的吸頭請打入盛有消毒劑的容器,，并與廢棄物一起滅菌后方可丟棄；
6.實驗完畢用 10%次氯酸或 75%酒精處理工作臺和移液器,然后用紫外線燈照射 20－30 分鐘,；
7.本試劑盒內陽性質控品應視為具有傳染性物質,，操作和處理均需符合相關法規(guī)要求：衛(wèi)生部《微生物生物醫(yī)學實驗室生物安全通用準則》和《醫(yī)療廢物管理條例》。
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【公司名稱】 廣州健侖生物科技有限公司
【 市場部 】 楊永漢
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