正相色譜柱和反相色譜柱的區(qū)別
閱讀:888 發(fā)布時間:2014-1-4
正相色譜柱和反相色譜柱的區(qū)別
本質(zhì)上是填料(固定相)的不同,正相色譜柱填料極性強,洗脫順序由弱到強;反相色譜柱填料極性弱,,洗脫順序由強到弱,。以下是詳細說明:
1、正相色譜 正相色譜用的固定相通常為硅膠(Silica)以及其他具有極性官能團胺基團,,如(NH2,,APS)和氰基團(CN,,CPS)的鍵合相填料,。
由于硅膠表面的硅羥基(SiOH)或其他極性基團極性較強,,因此,分離的次序是依據(jù)樣品中各組分的極性大小,,即極性較弱的組份zui先被沖洗出色譜柱,。正相色譜使用的流動相極性相對比固定相低,如正已烷(Hexane),,氯仿(Chloroform),,二氯甲烷(Methylene Chloride)等。
2,、反向色譜 反向色譜用的填料常是以硅膠為基質(zhì),,表面鍵合有極性相對較弱官能團的鍵合相。反向色譜所使用的流動相極性較強,,通常為水,、緩沖液與甲醇、乙腈等的混合物,。樣品流出色譜柱的順序是極性較強的組分zui先被沖洗出,,而極性弱的組分會在色譜柱上有更強的保留。
常用的反向填料有:C18(ODS),、C8(MOS)、C4(Butyl),、C6H5(Phenyl)等,。