首頁 >> 公司動(dòng)態(tài) >> 穩(wěn)定碳?xì)渫凰卦诟探郛a(chǎn)地溯源中應(yīng)用初探
中國是柑桔的重要原產(chǎn)地之一,，有4000多年的栽培歷史。柑桔色彩鮮艷,、酸甜可口,，是常見的美味佳果。然而我國柑桔資源豐富,，無論是栽培品種,，還是野生,、半野生種以及天然或人工育成的雜交類型等都極為繁多，形態(tài)復(fù)雜,，即使不同地域出產(chǎn)的柑桔外形上也十分相近,。光從外觀和口感上很難區(qū)分其產(chǎn)地來源，而柑桔的各種營養(yǎng)成分,、理化指標(biāo)也大同小異,，無法作為其產(chǎn)地來源的檢驗(yàn)依據(jù)。由于目前常用的理化分析方法及質(zhì)量指標(biāo)（可溶性固形物,、糖類和氨基酸態(tài)氮等）難以對這兩種果汁進(jìn)行區(qū)分,，柑桔的產(chǎn)地溯源有利于保護(hù)原產(chǎn)地，保護(hù)地區(qū),，保護(hù)特色產(chǎn)品,，確保公平競爭，增強(qiáng)消費(fèi)者對食品安全的信心,，并能有效防止食源性病源的擴(kuò)散,。因此，須建立一種穩(wěn)定,、有效的溯源檢測方法能的判斷柑桔的來源產(chǎn)地,。
同位素溯源技術(shù)是上目前用于追溯不同來源食品和實(shí)施產(chǎn)地保護(hù)的一種有效工具，植物組織中的同位素組成直接與其生長的地理環(huán)境與氣候環(huán)境密切相關(guān),，其中主要受地形的高度,、緯度，大氣壓力,、溫度,、濕度、降雨量等因素的影響,。目前,，通過檢測同位素豐度的方法判斷產(chǎn)地來源的植物源產(chǎn)品主要包括果汁、飲料,、酒、 ,、尼古丁,、丹參等[1～3]。早在20世紀(jì)末,，發(fā)達(dá)國家即著手穩(wěn)定同位素技術(shù)在食品真實(shí)性鑒別方面的研究,，并取得了多項(xiàng)成果[4]。20世紀(jì)70年代,，法國Bricout在對比NCF果汁和濃縮還原果汁的水中δD的研究中發(fā)現(xiàn)NFC果汁中明顯富集δD的現(xiàn)象[5],；德國Don-gmann的研究表明蒸騰作用使植物細(xì)胞組織內(nèi)的水分子中富集δD[6],。
國內(nèi)應(yīng)用穩(wěn)定同位素鑒別食品真實(shí)性的研究雖起步較晚，但也取得了初步成果 ：1994年,，馬希漢介紹了碳?xì)溲跬凰卦诠鎸?shí)性鑒別領(lǐng)域的應(yīng)用原理[7],；2008年，牛麗影在實(shí)驗(yàn)條件下研究了NFC果汁和濃縮還原果汁的氫氧同位素差異[8],；2011年鐘其頂利用氫和氧穩(wěn)定同位素實(shí)現(xiàn)NFC橙汁和濃縮還原橙汁的有效鑒別[9],。但穩(wěn)定性碳?xì)渫凰赜糜谥参镌葱允称樊a(chǎn)地溯源的應(yīng)用研究較少，利用碳?xì)浞€(wěn)定同位素判斷柑桔產(chǎn)地的研究還未見報(bào)道,。本試驗(yàn)分析了來自我國四大產(chǎn)區(qū)的柑桔中碳?xì)浞€(wěn)定同位素的組成差異,，探討了穩(wěn)定性碳?xì)渫凰刂笜?biāo)用于柑桔產(chǎn)地溯源的可行性。
1,、試驗(yàn)材料與方法
1.1試驗(yàn)材料
柑桔：分別從廣西（永?？h）、湖南（永州）,、四川（新津縣）,、福建（漳州）4個(gè)省的不同地區(qū)果園里采集，裝入自封袋中保藏,，采樣點(diǎn)的具體情況見表1,。
1.2主要儀器設(shè)備
MAT253 穩(wěn)定同位素比值質(zhì)譜儀（德國Finnigan公司）。
1.3試驗(yàn)方法
1.3.1樣品前處理 選取新鮮,、飽滿,、無病斑、無劃痕的柑桔,，去除果梗,、果核和果皮，切成狀放入攪拌機(jī)中攪拌5min,，2000r/min離心10min取上清液,，制柑桔果汁冷藏待用。將果汁轉(zhuǎn)至蒸餾瓶內(nèi),，真空濃縮,，餾出液作為測定氫同位素，濃縮果漿冷凍干燥,，充分研磨粉末轉(zhuǎn)移至自封袋中,，標(biāo)記后放人干燥器中保存作為測定碳同位素。
1.3.2穩(wěn)定性氫同位素比率檢測 按照DZ/T 0184.19-1997進(jìn)行同位素氫的測定,，結(jié)果以δD表示：
δD‰ = （R樣品/R標(biāo)準(zhǔn) -1）×l 000
式中：
R樣品-----所測樣品中2H豐度與1H的豐度比,；
R標(biāo)準(zhǔn)--- 標(biāo)準(zhǔn)樣品中2H豐度與1H的豐度比；
δD的標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)為V-SMOW。
1.3.3穩(wěn)定性碳同位素比率檢測 按照DZ/T 0184.17-1997進(jìn)行同位素碳的測定,，計(jì)算公式為：
δ13C‰ = （R樣品/R標(biāo)準(zhǔn)-1）×l 000
式中：
R樣品-----所測樣品中13C豐度與12C的豐度比,；
R標(biāo)準(zhǔn)--- 標(biāo)準(zhǔn)樣品中13C豐度與12C的豐度比；
δ13C的相對標(biāo)準(zhǔn)為V-PDB,。
采用Excell軟件對柑桔果汁中δ13C和δD進(jìn)行相關(guān)性處理,。
2、結(jié)果與分析
2.1不同地域來源柑桔果汁中的碳?xì)渫凰亟M成特征
測定了來自廣西,、湖南,、福建、四川地區(qū)的樣品δ13C和δD,，結(jié)果如表2所示,。
2.2柑桔果汁中碳同位素
4個(gè)地域之間柑桔果汁中碳同位素組成均有差異，大小依次排序?yàn)樗拇?gt;廣西>福建>湖南,。湖南與廣西,、四川樣品的碳同位素組成無重疊，而與福建樣品的碳同位素組成有部分重疊,，湖南與福建樣品無顯著差異,，而湖南、福建兩地與廣西,、四川兩地樣品之間有極顯著差異,，且四川、廣西樣品的δ13C值明顯高于福建,、湖南的樣品,。在陸生植物組織中13C/12C比發(fā)生變化的主要原因是由于植物固定CO2的方式不同。植物固定CO2可通過C3途徑（即卡爾文循環(huán)）,、C4途徑（即C4二羧酸途徑）和景天酸代謝（CAM）途徑,。在C3途徑中，二氧化碳的受體是1,，5一二磷酸核酮糖,，它接受CO2后，在1,，5一二磷酸核酮糖羧化酶的催化下,，形成兩分子的3一磷酸甘油酸，因?yàn)樗侨蓟衔?，故稱C3途徑,。柑桔為C3植物，C3光合途徑在二氧化碳的固定過程中顯示出很強(qiáng)的同位素效應(yīng),，由于二磷酸核酮糖羧化酶的作用,，C3植物偏向于對質(zhì)量較輕的碳同位素12C的吸收（同位素分餾率為29），它們的13C/12C比較小,，δ13C的負(fù)值相應(yīng)較大,，一般在-22‰～-33‰之間。
2.3柑桔果汁中氫同位素
不同地域柑桔果汁中δD同位素組成有極顯著差異,，排序依次為廣西>湖南>福建>四川,，δD值有顯著的相關(guān)性，柑桔果汁的δD值有隨著地理緯度增加而減小的趨勢,。柑桔果汁都比純凈水富集δD,，這是由于蒸騰作用使植物組織內(nèi)的水富集δD。其中柑桔果汁中δD比純凈水高約50%,，這與馬希漢介紹的情況相符,。造成柑桔果汁中和有差異的原因，有兩方面：其一,，是果樹生長區(qū)域的地下水,、地表水中氫同位素組成。陸地上的水分終來源于海洋,，水循環(huán)中的蒸發(fā),、凝降過程都會導(dǎo)致氫氧同位素分餾，其中高緯度地區(qū),、高海拔地區(qū)以及距離海岸線遠(yuǎn)
的地區(qū)水中δD值比較低,，果汁中的水歸根結(jié)底是根系吸收的地下水/地表水，其δD是果汁水中氫同位素組成的基礎(chǔ),；其二,，果樹的蒸騰作用會使植物組織內(nèi)部的水比地下水/地表水富集δD，其蒸騰作用強(qiáng)度受果樹生長條件的影響,，溫暖,、干燥的地區(qū)蒸騰強(qiáng)度較大，更容易富集δD,。因此,，δD是判斷產(chǎn)品地理來源的工具[10]。
2.4δ13C和δD同位素溯源
以柑桔果汁中δ13C和δD數(shù)據(jù)為基礎(chǔ),，用貝葉斯判別分析方法可將不同地域來源的柑桔區(qū)分開來,，δ13C數(shù)據(jù)正確判別率對于廣西、湖南,、福建,、四川分別為80%、80%,、60%,、60%，整體平均正確判別率僅為70% ；δD數(shù)據(jù)正確判別率對于廣西,、湖南,、福建、四川均為100%,。
3,、結(jié)論
在本試驗(yàn)中，各地柑桔果汁中δ13C和δD數(shù)據(jù)顯著不同,，不同地域來源的柑桔果汁δD值的差異顯著,，有隨著地理緯度增加而減小的趨勢。因此,，δD可作為判斷產(chǎn)品地理來源的一個(gè)有力指標(biāo),，柑桔果汁中 同位素組成均可反映柑桔來源地的信息。在今后的研究分析中還可聯(lián)合δ18O,、δ15N,、δ34S等穩(wěn)定同位素指標(biāo)來進(jìn)行產(chǎn)地溯源，構(gòu)成柑桔的穩(wěn)定同位素產(chǎn)地溯源指紋圖譜,，以提高穩(wěn)定同位素分析技術(shù)對柑桔產(chǎn)地溯源的性和實(shí)用性,。
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