日韩av大片在线观看欧美成人不卡|午夜先锋看片|中国女人18毛片水多|免费xx高潮喷水|国产大片美女av|丰满老熟妇好大bbbbbbbbbbb|人妻上司四区|japanese人妻少妇乱中文|少妇做爰喷水高潮受不了|美女人妻被颜射的视频,亚洲国产精品久久艾草一,俄罗斯6一一11萝裸体自慰,午夜三级理论在线观看无码

上海研謹(jǐn)生物科技有限公司
中級會員 | 第15年

13585717991

當(dāng)前位置:首頁   >>   資料下載   >>   大鼠腦膠質(zhì)瘤細(xì)胞(C6)

實(shí)驗(yàn)代做
進(jìn)口血清
細(xì)胞及相關(guān)培養(yǎng)
分離液,、分離液試劑盒
酶聯(lián)免疫ELISA試劑盒
標(biāo)準(zhǔn)品,、對照品
蛋白質(zhì)技術(shù)服務(wù)
生化試劑
Peprotech細(xì)胞因子
動物疾病類檢測試劑盒
食品安全檢測試劑盒
抗體
實(shí)驗(yàn)耗材

大鼠腦膠質(zhì)瘤細(xì)胞(C6)

時(shí)間:2020-6-12閱讀:200
分享:
  • 提供商

    上海研謹(jǐn)生物科技有限公司
  • 資料大小

    128.9KB
  • 資料圖片

  • 下載次數(shù)

    35次
  • 資料類型

    PDF 文件
  • 瀏覽次數(shù)

    200次
點(diǎn)擊免費(fèi)下載該資料

             大鼠腦膠質(zhì)瘤細(xì)胞(C6)

 

細(xì)胞介紹

膠質(zhì)細(xì)胞株C6是由Benda等用N-nitrosomethylurea誘導(dǎo)的大鼠膠質(zhì)瘤克隆,并經(jīng)過一系列的體外培養(yǎng)和動物傳代交替后建成的,。當(dāng)細(xì)胞從低密度生長到滿瓶時(shí),,S-100產(chǎn)量增加10倍

 

細(xì)胞特性

1) 來源:大鼠,,膠質(zhì)瘤

2) 形態(tài)成纖維細(xì)胞,,貼壁生長

3) 含量:>1x106

4) 污染:支原體、細(xì)菌,、酵母和真菌檢測為陰性

5) 規(guī)格:T25瓶或者1mL凍存管包裝

 

運(yùn)輸和保存:可選擇干冰運(yùn)輸及發(fā)送復(fù)蘇存活細(xì)胞方式:1干冰運(yùn)輸,,收到后立即轉(zhuǎn)入液氮凍存或直接復(fù)蘇;2存活細(xì)胞收到后應(yīng)繼續(xù)生長,,傳代達(dá)到細(xì)胞生長狀態(tài)良好時(shí),,再進(jìn)行凍存。具體操作見細(xì)胞培養(yǎng)步驟,。

 

細(xì)胞用途:僅供科研使用,。

 

細(xì)胞接收后的處理:

1) 收到細(xì)胞后,請檢查發(fā)貨培養(yǎng)瓶的狀況,,若發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)瓶破損,、有液溢出及細(xì)胞有污染,請拍照后及時(shí)聯(lián)系我們,。

2) 在顯微鏡下確認(rèn)細(xì)胞生長狀態(tài)時(shí),,hao在低倍鏡(4或5X物鏡)下進(jìn)行,能準(zhǔn)確判斷細(xì)胞的傳代密度,??醇?xì)胞的形態(tài)請?jiān)?0X和20×物鏡下,同時(shí)給剛收到的細(xì)胞拍照,,(10×,,20×)各2-3張以及培養(yǎng)瓶外觀照片一張留存,作為細(xì)胞需要售后時(shí)提供收到細(xì)胞時(shí)細(xì)胞狀態(tài)的依據(jù),。

3) 觀察好細(xì)胞狀態(tài)后,,75%酒精消毒瓶壁將T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱放置約2-3h。

4) 貼壁細(xì)胞:在運(yùn)輸過程中貼壁細(xì)胞會有脫落的現(xiàn)象,,如發(fā)現(xiàn)貼壁細(xì)胞有脫落或者脫落后抱團(tuán)生長,,可將T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱放置約2-3h,然后抽出瓶中的培養(yǎng)基和未貼壁細(xì)胞1000rpm離心5分鐘,,棄去上清重懸后接種到加有按照說明書細(xì)胞培養(yǎng)條件新配制的*培養(yǎng)基的原培養(yǎng)瓶中(或新的培養(yǎng)瓶中),。

5) 懸浮細(xì)胞:T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱放置約2-3h,然后抽出瓶中的培養(yǎng)基和細(xì)胞1000rpm離心5分鐘,,棄去上清重懸后接種到新的培養(yǎng)瓶中(加入按照說明書細(xì)胞培養(yǎng)條件新配制的*培養(yǎng)基),。

6)備注:運(yùn)輸用的培養(yǎng)基(灌液培養(yǎng)基)不能再用來培養(yǎng)細(xì)胞,請換用按照說明書細(xì)胞培養(yǎng)條件新配制的*培養(yǎng)基來培養(yǎng)細(xì)胞,。  收到細(xì)胞后第yi次傳代建議1:2傳代 ,。

 

                       

細(xì)胞培養(yǎng)步驟

一.培養(yǎng)基培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:

1) 準(zhǔn)備F12K(推薦iCell-0007培養(yǎng)基;馬血清,,15%,;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,2.5%,;雙抗,,1%,。注:單一血清培養(yǎng)細(xì)胞的不能保證細(xì)胞狀態(tài)。

2) 培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,,95%,;二氧化碳,5%,。 溫度:37攝氏度,,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3) 凍存液90%血清,,10%DMSO,,現(xiàn)用現(xiàn)

二. 細(xì)胞處理

1) 復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,,棄去上清液,,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或將細(xì)胞懸液加入10cm皿中,,加入8ml培養(yǎng)基,,培養(yǎng)過夜)。第二天換液并檢查細(xì)胞密度,。

2) 細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,,可進(jìn)行傳代培養(yǎng)

對于貼壁細(xì)胞,,傳代可參考以下方法:

1. 棄去培養(yǎng)上清,,用不含鈣、鎂離子PBS潤洗細(xì)胞1-2,。

2. 加2ml消化液0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)培養(yǎng)瓶中,,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,,細(xì)胞大部分變圓并脫落,,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化,。

3. 按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,,棄去上清液,,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。

4. 收到細(xì)胞后*傳代推薦將細(xì)胞懸液按1:2的比例分到新的6ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,,建議凍存一支備用,,后續(xù)傳代根據(jù)實(shí)際情況按1:2到1:5的比例進(jìn)行,。

3)細(xì)胞凍存:細(xì)胞生長狀態(tài)良好時(shí),進(jìn)行細(xì)胞凍存,。貼壁細(xì)胞凍存時(shí),,棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶,細(xì)胞變圓脫落后,,加入約1ml血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中,,再添加10%DMSO進(jìn)行凍存

下面T25瓶為類,;

      1,,細(xì)胞凍存時(shí),棄去培養(yǎng)基后,,PBS清洗一遍后加入1ml胰酶,,細(xì)胞變圓脫落后,加入1ml血清的培養(yǎng)基終止消化,,可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù),。

      2,4min 1000rpm 離心去掉上清,。加1ml血清重懸細(xì)胞,,根據(jù)細(xì)胞數(shù)量加入血清和DMSO,輕輕混勻,,DMSO終濃度為10%,,細(xì)胞密度不低于1x10E6/ml,每支凍存管凍存1ml細(xì)胞懸液,,注意凍存管做好標(biāo)識,。

      3,將凍存管置于程序降溫盒中,,放入-80度冰箱,,至少2個(gè)小時(shí)以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取,。

 

 

注意事項(xiàng):

1. 收到細(xì)胞后,,若發(fā)現(xiàn)干冰已揮發(fā)干凈、凍存管瓶蓋脫落,、破損及細(xì)胞有污染,,請立即與我們聯(lián)系

2. 所有動物細(xì)胞均視為潛在的生物危害性,,必須在二級生物安全內(nèi)操作,,并請注意防護(hù),所有廢液及接觸過此細(xì)胞的器皿需要滅菌后方能丟棄,。

 

CCK8實(shí)驗(yàn)代做報(bào)價(jià)

會員登錄

×

請輸入賬號

請輸入密碼

=

請輸驗(yàn)證碼

收藏該商鋪

X
該信息已收藏,!
標(biāo)簽:
保存成功

(空格分隔,最多3個(gè),單個(gè)標(biāo)簽最多10個(gè)字符)

常用:

提示

X
您的留言已提交成功!我們將在第一時(shí)間回復(fù)您~
撥打電話
在線留言