植物淀粉含量試劑盒說明書

可見分光光度法

正式測定前務(wù)必取2-3個預(yù)期差異較大的樣本做預(yù)測定

測定意義：

淀粉是植物中糖的主要儲存形式,，其含量測定對于評價(jià)食品營養(yǎng)價(jià)值和調(diào)查植物體內(nèi)糖代謝都有重要意義,。

測定原理：

利用 80％乙醇可以把樣品中可溶性糖與淀粉分開，進(jìn)一步采用酸水解法分解淀粉為葡萄糖,，采用蒽酮比色法測定葡萄糖含量,，即可計(jì)算淀粉含量。

需自備的儀器和用品：

可見分光光度計(jì),、水浴鍋,、可調(diào)式移液器、玻璃比色皿,、研缽,、冰、濃硫酸（不允許快遞）,、

研缽和蒸餾水,。

試劑的組成和配制：

試劑一：液體 50mL×1 瓶，4℃保存；

試劑二：液體 20mL×1 瓶,，4℃保存,；

試劑三：粉劑×1 瓶，4℃保存,；

淀粉提?。?/span>

1、 稱取0.1~0.2g 樣本（建議稱取約0.1g樣本）于研缽中研碎,，加入1mL試劑一,，充分勻漿后轉(zhuǎn)移到EP管中，80℃水浴提取30min,，3000g,，25℃離心5min，棄上清,，留沉淀,。

2、 沉淀中加入0.5mL蒸餾水,，放入95℃水浴中糊化15min（蓋緊，以防止水分散失）,。

3,、 冷卻后，加入0.35mL 試劑二,，25℃提取15min,，振蕩3-5次。

4,、 加入0.85mL 蒸餾水,，混勻，3000g,，25℃離心10min,，取上清液待測。

測定操作表 （在 1.5mL EP 管中依次加入下列試劑） ：

1,、 分光光度計(jì)預(yù)熱30min以上,，調(diào)節(jié)波長至620nm，蒸餾水調(diào)零,。

2,、 調(diào)節(jié)水浴鍋至 95 度。

3,、 工作液的配制：臨用前在試劑三中加入7.5mL蒸餾水后,，緩慢加入42.5mL濃硫酸，不斷攪拌，充分溶解,，待用,；用不完的試劑 4℃保存一周；

4,、 樣本測定：取0.2mL樣本和1mL工作液至EP管中,，95度水浴10 min（蓋緊，防止水分散

失）,，自然冷卻至室溫,，在620 nm 波長下記錄測定吸光度值A(chǔ)。

淀粉含量計(jì)算：

標(biāo)準(zhǔn)條件下測定的回歸方程為 y=5.872x-0.0295,；

x 為標(biāo)準(zhǔn)品濃度（mg/mL）,，y 為吸光值。

1,、按照蛋白濃度計(jì)算

淀粉含量(mg/mg prot)=[(A+0.0295)×V1]÷5.872 ÷(V1×Cpr)=0.17×(A+0.0295) ÷Cpr

2,、按樣本鮮重計(jì)算

淀粉含量(mg/g 鮮重)= [(A+0.0295)×V1]÷(W×V1÷V2) =0.289×(A+0.0295) ÷W

V1：加入反應(yīng)體系中樣本體積，0.2mL,；V2：加入提取液體積,，1.7 mL；Cpr：樣本蛋白質(zhì)

濃度,，mg/mL,；W：樣本質(zhì)量，g

注意 ：由于工作液具有強(qiáng)腐蝕性,，請謹(jǐn)慎操作,。

若吸光值大于1，請將樣本用提取液稀釋后再測定,，計(jì)算公式中乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù),。

提取液的配置：0.35mL 試劑二+1.35mL 水。用多少按照此比例配多少,。

低檢測限為10μg/g  鮮重或100ng/mgprot ,。

DC2.4小鼠樹突狀細(xì)胞