怎樣縮小ELISA實驗中的誤差

   在自然因素（試劑穩(wěn)定性,、準確率,、儀器精密度）和人為因素（操作者）并存的情況下，要準確報告實驗結果,，尚為一個值得探討的話題?，F從以下方面加以討論。

 （1）檢驗技師應具備從事實驗室操作的基本素質和實踐經驗,。能熟練操作實驗儀器,、器械，具有一定總結和分析問題的能力,，對實驗中出現的意外情況能及時妥善解決,。

 （2）使用校對過的微量移液器,，排除自然誤差。移液器準確與否對定量檢測尤為重要,。

  （3） 評估試劑的實用性,。試劑的穩(wěn)定與否，對準確率的高低到頭重要,。在試劑啟用前,，應進行陰、陽對照及樣品反復比照試驗,，判定試劑符合要求后方可使用,。

 （4）操作前仔細閱讀說明書。嚴格按照說明書要求進行規(guī)范化操作,。不同批號的試劑不可混用,。值得改進的地方，反復試驗確定成立后才能改進,，比如洗板次數的掌握等,。

   （5） 加樣要準確、快速,?；瘜W理論表明，生成物的量與反應物的量成正相關,。加樣不準確,，酶生成物的量不能確定，直接影響顯色結果,。另外,，顯色的深淺及A值的測定與加入顯色劑和終止液的量有關，所以加樣應慎重,。要求在一定時間內加樣完畢的實驗,，如果加樣遲緩，便出現誤差,，而且試劑長時間暴露在外,，尤其室溫過高時，保存期會縮短甚至失效,。

  （6）洗滌*,。洗板不*，酶結合物本底顯色會呈現假陽性,。另外,，洗滌液要新鮮，現用現配,，陳舊的洗滌液會出現本底增高現象,，也可能出現假陽性,。

  （7）嚴控反應時間。反應時間過長,，酶失活；反應時間過短,，酶結合物不能與血清中的微生物抗原抗體充分結合,，生成物結構松散不牢固，容易洗掉,，都可能造成假陰性,。

  （8）嚴格掌握顯色時間。顯色時間過短,，加入終止液反應終止后,，底物結合物的量過少，易出現假陰性,。超過顯色要求時間后顯色,，應判為假陽性，這可能與試劑本身有關,。加顯色劑后立即顯色,，不可報陽性，這可能是本底顯色的結果,。

  （9）注意試劑保存期,，過保存期的試劑不能使用。