縮小ELISA檢測誤差

   在自然因素（試劑穩(wěn)定性、準確率,、儀器精密度）和人為因素（操作者）并存的情況下,，要準確報告實驗結(jié)果，尚為一個值得探討的話題?，F(xiàn)從以下方面加以討論,。

 （1）檢驗技師應(yīng)具備從事實驗室操作的基本素質(zhì)和實踐經(jīng)驗。能熟練操作實驗儀器,、器械,，具有一定總結(jié)和分析問題的能力，對實驗中出現(xiàn)的意外情況能及時妥善解決。

 （2）使用校對過的微量移液器,，排除自然誤差,。移液器準確與否對定量檢測尤為重要。

  (3) 評估試劑的實用性,。試劑的穩(wěn)定與否,，對準確率的高低到頭重要。在試劑啟用前,，應(yīng)進行陰,、陽對照及樣品反復(fù)比照試驗，判定試劑符合要求后方可使用,。

 （4）操作前仔細閱讀說明書,。嚴格按照說明書要求進行規(guī)范化操作。不同批號的試劑不可混用,。值得改進的地方,，反復(fù)試驗確定成立后才能改進，比如洗板次數(shù)的掌握等,。

   (5) 加樣要準確,、快速?；瘜W(xué)理論表明,，生成物的量與反應(yīng)物的量成正相關(guān)。加樣不準確,，酶生成物的量不能確定,，直接影響顯色結(jié)果。另外,，顯色的深淺及A值的測定與加入顯色劑和終止液的量有關(guān),，所以加樣應(yīng)慎重。要求在一定時間內(nèi)加樣完畢的實驗,，如果加樣遲緩,，便出現(xiàn)誤差，而且試劑長時間暴露在外,，尤其室溫過高時,，保存期會縮短甚至失效。

  （6）洗滌*,。洗板不*,，酶結(jié)合物本底顯色會呈現(xiàn)假陽性。另外,，洗滌液要新鮮,，現(xiàn)用現(xiàn)配,，陳舊的洗滌液會出現(xiàn)本底增高現(xiàn)象，也可能出現(xiàn)假陽性,。

  （7）嚴控反應(yīng)時間,。反應(yīng)時間過長，酶失活,；反應(yīng)時間過短，酶結(jié)合物不能與血清中的微生物抗原抗體充分結(jié)合,，生成物結(jié)構(gòu)松散不牢固,，容易洗掉，都可能造成假陰性,。

  （8）嚴格掌握顯色時間,。顯色時間過短，加入終止液反應(yīng)終止后,，底物結(jié)合物的量過少,，易出現(xiàn)假陰性。超過顯色要求時間后顯色,，應(yīng)判為假陽性,，這可能與試劑本身有關(guān)。加顯色劑后立即顯色,，不可報陽性,，這可能是本底顯色的結(jié)果。

  （9）注意試劑保存期,，過保存期的試劑不能使用,。

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