酶標板工作原理
酶標板(ELISA PLATE):在酶聯(lián)免疫吸附試驗(Enzyme Linked Immunosorbent Assay,ELISA)中,參與免疫學反應的抗原、抗體、標記抗體或抗原的純度,、濃度和比例;緩沖液種類,、濃度和離子強度、pH值和反應溫度,、時間等條件起著關鍵作用,。此外,作為載體的固相聚苯乙烯(Polystyrene)表面對抗原、抗體或抗原抗體復合物的吸附也起著重要作用,。
抗原,、抗體和其它生物分子通過多種機制吸附至載體表面,這包括通過疏水鍵,、流水/離子鍵的被動吸附,通過引入其它活性基團如氨基和碳基的共價結合,,以及通過表面改性后的親水鍵結合。
酶標板根據(jù)其孔數(shù)可以分為48孔,,96孔,。一般常用的為96孔,,這要根據(jù)您的酶標儀進行選擇,。另外,又分可拆和不可拆的,,對于不可拆的,,就是一整塊板上的板條都是連在一起的,那么可拆的就是板子上面的板條是分開的,,分出來的板條又有12孔和8孔之分,。一般現(xiàn)在用的較多的是可拆的酶標板,如果你之前買了一些這樣的板子,,那么現(xiàn)在*可以只買些酶標板條就可以了,。不同的廠家做出來的酶標板雖然整體看上去是差不多的,但是有些小的細節(jié)方面會做的不一樣,,比如結構等,,這主要是因為要配合不同酶標儀使用,因此,,當你在選擇購買酶標板時還要考慮一下你的酶標儀是什么樣子,。不過一般都是適配的,,只有個別的會有所不同。 因為酶標板的材質一般為聚苯乙烯(PS),,而聚苯乙烯的化學穩(wěn)定性較差,,可以被多種有機溶劑(如:芳烴、鹵代烴等)溶解,,會被強酸強堿腐蝕,,不抗油脂,在受到紫外光照射后易變色,,所以在使用過程中一定要注意這些,。
可以使用已知濃度的某蛋白溶液,在ELISA用的空白聚苯乙烯板上進行包被,。包被結束后測定孔內溶液的蛋白濃度,,包被前孔內蛋白量減去包被后的蛋白量就是吸附在酶標板上的蛋白量。這樣就可以知道酶標板的吸附性,。