熒光光譜儀主要包括光源、激發(fā)單色器,、樣品池、熒光單色器及檢測器等主要部件,。

　　1.光源

　　早期的熒光分光光度計,，配有能發(fā)生很窄汞線的低壓汞燈。使用高壓汞燈,，譜線被加寬,，而且也存在高強度的連續(xù)帶,。然而，一個完整的激發(fā)光譜的測定需一種能發(fā)射從可見到紫外范圍的較高強度的光輻射的燈,。氙弧燈能適于此條件,，因此，它是目前在熒光分光光度計中廣泛使用的光源,。

　　2.單色器

　　單色器的作用是把光源發(fā)出的連續(xù)光譜分解成單色光,，并能準(zhǔn)確方便地“取出”所需要的某一波長的光，它是光譜儀的心臟部分,。單色器主要由狹縫,、色散元件和透鏡系統(tǒng)組成，其中色散元件是關(guān)鍵部件,。色散元件是棱鏡和反射光柵或兩者的組合,，它能將連續(xù)光譜色散成為單色光。

　　(1)棱鏡單色器

　　棱鏡單色器是利用不同波長的光在棱鏡內(nèi)折射率不同將復(fù)合光色散為單色光的,。棱鏡色散作用的大小與棱鏡制作材料及幾何形狀有關(guān),。常用的棱鏡用玻璃或石英制成?？梢姺止夤舛扔嬁梢圆捎貌?，它適用于紫外、可見整個光譜區(qū),。

　　(2)光柵單色器

　　光柵作為色散元件具有不少*的優(yōu)點,。光柵可定義為一系列等寬、等距離的平行狹縫,。光柵的色散原理是以光的衍射現(xiàn)象和干涉現(xiàn)象為基礎(chǔ)的,。常用的光柵單色器為反射光柵單色器，它又分為平面反射光柵和凹面反射光柵兩種,，其中常用的是平面反射光柵,。光柵單色器的分辨率比棱鏡單色器分辨率高(可達±0.2nm)，而且它可用的波長范圍也比棱鏡單色器寬,，且入射光80%的能量在一級光譜中,。近年來，光柵的刻制復(fù)制技術(shù)也在不斷地改進,，其質(zhì)量也在不斷的提高,，因而其應(yīng)用日益廣泛。

　　(3)狹縫

　　狹縫是單色器的重要組成部分,，直接影響到分辨率,。狹縫寬度越小，單色性越好,，但光強度也隨之減少,。

　　3.樣品池

　　熒光儀用的樣品池需用低熒光的材料制成,，通常用玻璃和石英材料，形狀以方形和長方形為宜,。

　　4.檢測器

　　主要有硒光電池,、光電管和光電倍增管等。目前來說由于熒光的強度較弱,，一般以光電倍增管作檢測器,。選擇光電倍增管要考慮響應(yīng)波長、靈敏度和噪聲水平等,。藍敏管對蛋白質(zhì),、核酸的測量適用，而紅敏管則適用于熒光染料檢測,。

　　熒光光譜儀的主要應(yīng)用

　　(1)在生物領(lǐng)域的應(yīng)用

　　該領(lǐng)域主要用于臨床測定生物樣品中某些成分的含量,，生物技術(shù)及免疫技術(shù)的分析等，如脫氧核糖和脫氧核糖核酸的含量測定,、DNA,、抗體、抗原等各方面的研究,。在此領(lǐng)域中主要時利用各種熒光探針進行分析檢測,，主要分為生物納米熒光探針和生物非納米熒光探針。

　　其中納米技術(shù)的興起,，打開了熒光分析的又一個新的領(lǐng)域,。由于納米材料具有很好的熒光性，寬激發(fā),，窄發(fā)射等優(yōu)良的光譜特點,，使其成為熒光分析中的重要的研究對象，引起了研究者的興趣,。

　　(2)在食品領(lǐng)域的應(yīng)用

　　該領(lǐng)域主要用于食品中礦物質(zhì)及金屬元素,、氨基酸、維生素,、菌類污染,、添加劑、防腐劑,、食品包裝有害物質(zhì),、農(nóng)藥殘留等的分析檢測。特別是與HPLC,、TLC,、FIA等技術(shù)的結(jié)合可以更好的達到食品中各種物質(zhì)的檢測效果。

　　目前我國食品標(biāo)準(zhǔn)日趨化，對于食品分析的要求也越來越趨向于靈敏和微量化,。熒光分析正可以滿足這方面的分析要求。

　　(3)在藥物分析中的應(yīng)用

　　藥物分析領(lǐng)域可以利用熒光分析進行藥物的有效成分鑒定,、藥物代謝動力學(xué)研究,、臨床藥理藥效分析等。

　　藥物熒光分析可以分為三類：直接熒光分析,、間接熒光分析和納米熒光分析,。

　　常規(guī)熒光分析法早被應(yīng)用于分析抗瘧疾藥物奎寧，隨著熒光分析法的發(fā)展,，其應(yīng)用范圍日益擴大,，目前被廣泛用于抗菌素藥物、止痛藥,、鎮(zhèn)靜劑,、止血藥等的分析。

　　(4)在環(huán)境分析中的應(yīng)用

　　該領(lǐng)域主要利用熒光分析檢測環(huán)境中的物質(zhì)的含量,，主要是對水體,、礦石和土壤進行檢測。隨著有機化工,、石油化工,、醫(yī)藥工業(yè)的發(fā)展, 以及農(nóng)藥( 殺蟲劑、除草劑等) 的大量使用, 有機化合物對環(huán)境的危害和污染日益嚴(yán)重,。

　　目前被列入有機污染物監(jiān)測國家標(biāo)準(zhǔn)方法中的熒光分析法有,；冷原子熒光法對有機汞的測定；乙?；癁V紙層析熒光分光光度法對大氣飄塵和水體中苯并( a) 芘的測定,；酚類 、木質(zhì)磺酸酯,、多環(huán)芳烴( 芘,、螢、蒽) [ PASH]的熒光分析法測定等,。