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目前,，我國(guó)絲蟲病已由過去的嚴(yán)重流行達(dá)到全國(guó)范圍內(nèi)的基本消滅,，并向消滅該病的歷史進(jìn)程邁進(jìn),。因此，衛(wèi)生部已在全國(guó)寄生蟲病防治計(jì)劃中指出：“絲蟲病監(jiān)測(cè)技術(shù)是當(dāng)前寄生蟲病防治工作中亟待解決的關(guān)鍵技術(shù)問題",。

產(chǎn)品介紹

目前,，我國(guó)絲蟲病已由過去的嚴(yán)重流行達(dá)到全國(guó)范圍內(nèi)的基本消滅，并向消滅該病的歷史進(jìn)程邁進(jìn),。因此,，衛(wèi)生部已在全國(guó)寄生蟲病防治計(jì)劃中指出：“絲蟲病監(jiān)測(cè)技術(shù)是當(dāng)前寄生蟲病防治工作中亟待解決的關(guān)鍵技術(shù)問題”,。應(yīng)用抗人IgG₄單抗診斷絲蟲病和對(duì)絲蟲病流行地區(qū)人群特異的抗絲蟲IgG₄水平分析均取得較好的效果，且與世界衛(wèi)生組織推薦的快速免疫色譜技術(shù)（ICT）檢測(cè)血清中絲蟲抗原進(jìn)行對(duì)比研究,，顯示檢測(cè)絲蟲特異IgG₄不僅可用于現(xiàn)癥患者診斷和療效考核,，而且特別適用于消滅絲蟲病地區(qū)病原學(xué)的監(jiān)測(cè)，以代替價(jià)格昂貴的ICT卡檢查和費(fèi)時(shí)費(fèi)力的傳統(tǒng)夜間采血鏡檢方法,。

近來研究表明,，絲蟲特異IgG₄的檢出與血內(nèi)微絲蚴的存在有*性，機(jī)體感染絲蟲后血清特異IgG₄水平顯著升高,，感染消除后特異IgG₄迅速降低或消失,。因此，檢測(cè)絲蟲特異IgG₄在絲蟲病診斷和監(jiān)測(cè)中具有很好的應(yīng)用價(jià)值,。本試劑采用*的酶免疫檢測(cè)系統(tǒng)和敏感,、特異的抗人IgG₄單抗相結(jié)合,檢測(cè)人血清樣本中絲蟲特異IgG₄。

●試劑盒組成

絲蟲抗原包被板	48T/96T;	樣本稀釋液	1瓶,；
抗人IgG₄酶結(jié)合物	1瓶,；	終止液	1瓶；
PBST固體洗滌劑	1袋/2袋,；	陰性對(duì)照	1支,；
底物稀釋液	1瓶；	陽(yáng)性對(duì)照	1支,；
底物干粉	1支,；	使用說明書	1份；

●樣本稀釋

1. 洗滌液及樣本稀釋液的配制：將每袋PBST固體洗滌劑用500ml蒸餾水充分溶解,，作為反應(yīng)板洗滌液,。

2. 樣本稀釋

血清直接進(jìn)行加樣反應(yīng)。

濾紙血濾紙血樣本按直徑1.1cm圓片加200ul樣本稀釋液,，37℃浸泡2小時(shí)（或4℃過夜）稀釋處理,。

●操作程序

1. 加樣反應(yīng)：取出所需量的反應(yīng)板條，若為血清樣本,，則每孔加樣本稀釋液（5號(hào)液）2滴,，再分別加入待檢的血清樣本10ul混勻；若為濾紙血樣本,，則直接加入100ul已稀釋處理好的濾紙血樣本即可,。同時(shí)設(shè)陰性、陽(yáng)性及空白對(duì)照各1孔,，陰性,、陽(yáng)性對(duì)照與血清樣本處理方法相同，空白對(duì)照孔僅加入樣本稀釋液（5號(hào)液）2滴,。37℃避光反應(yīng)90分鐘后甩去孔內(nèi)液體,，每孔注滿洗滌液,，靜置30秒后甩去，共洗五次,，每次均需靜置30秒,，zui后一次甩去，拍干,。

2. 加酶反應(yīng)：除空白對(duì)照孔外其余每孔加酶結(jié)合物（1號(hào)液）2滴,，37℃避光反應(yīng)90分鐘后甩去孔內(nèi)液體，如上洗滌,，拍干,。

3. 顯色反應(yīng)：將底物干粉*溶解于底物稀釋液中，混勻,，每孔加入底物溶液2滴,，37℃下避光顯色30分鐘。加終止液（6號(hào)液）1滴,，混勻,，終止反應(yīng)并判讀結(jié)果。

●結(jié)果判斷

1．肉眼觀察：陰性對(duì)照無色,，陽(yáng)性對(duì)照呈明顯黃色,，表示試驗(yàn)有效。待檢孔呈無色表示該標(biāo)本為陰性,，待檢孔呈黃色表示

該標(biāo)本為陽(yáng)性,。

2. 儀器判斷：以空白對(duì)照調(diào)零用酶標(biāo)儀于405nm波長(zhǎng)讀取O.D值，待檢孔O.D值大于陰性對(duì)照2.1倍者為陽(yáng)性,。

當(dāng)陰性對(duì)照O.D值低于0.05時(shí)按0.05計(jì)算,。

●注意事項(xiàng)

1. 檢測(cè)盒置于4℃可保存6個(gè)月，取用時(shí)應(yīng)先恢復(fù)至室溫,。

2. 底物溶解后4℃避光可保存一周,，不能長(zhǎng)期保存，應(yīng)盡快用完,。

3. 肉眼判斷結(jié)果不太鮮明,，以酶標(biāo)儀測(cè)OD值來判斷結(jié)果。

4. 樣本要長(zhǎng)期保存時(shí)須置于-20℃,。

5. 終止液有腐蝕性,，應(yīng)避免與皮膚接觸。

6. 不同試劑盒內(nèi)各種試劑不能混用,，并防止樣品、試劑間交叉污染,。

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