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●試劑組成

1.預(yù)包被板	48T/96T;	6.樣本稀釋液（5號(hào)液）	1支;
2.酶結(jié)合物（1號(hào)液）	1支;	7. 終止液（6號(hào)液）	1支;
3.洗滌液（2號(hào)液）	1支;	8. 陽(yáng)性對(duì)照品	1支;
4.底物（3號(hào)液）	1支;	9. 陰性對(duì)照品	1支;
5.顯色劑（4號(hào)液）	1支;	10.使用說(shuō)明書(shū)	1份;

●操作程序

1. 樣本稀釋?zhuān)河脴颖鞠♂屢海?號(hào)液）將待檢血清按1:100稀釋。陰,、陽(yáng)對(duì)照不用稀釋,直接加樣,。

2. 加樣反應(yīng)：樣本檢測(cè)孔每孔分別加已稀釋樣本血清100ul。同時(shí)設(shè)陰性,、陽(yáng)性及空白對(duì)照各1孔,，取陰性、陽(yáng)性對(duì)照各100ul分別加入反應(yīng)孔內(nèi),，空白對(duì)照孔僅加入100ul樣本稀釋液（5號(hào)液）,。37℃避光反應(yīng)30分鐘后甩去孔內(nèi)液體，每孔加洗滌液（2號(hào)液）1滴，立即用蒸餾水注滿(mǎn),，靜置30秒后甩去,，再直接用蒸餾水洗滌四次，甩去,，拍干,。

3. 加酶反應(yīng)：除空白對(duì)照孔外其余每孔加酶結(jié)合物（1號(hào)液）2滴，37℃避光反應(yīng)30分鐘后甩去孔內(nèi)液體,，如上洗滌,，拍干。

4. 顯色反應(yīng)：加底物（3號(hào)液）和顯色劑（4號(hào)液）各1滴,，混勻,，37℃下避光顯色10分鐘。加終止液（6號(hào)液）1滴,，混勻,，終止反應(yīng)（加終止液后藍(lán)色會(huì)變?yōu)辄S色）并判讀結(jié)果。

●結(jié)果判斷

1．肉眼觀察：陰性對(duì)照接近無(wú)色,，陽(yáng)性對(duì)照呈明顯黃色,，表示試驗(yàn)有效。待檢孔接近無(wú)色表示該標(biāo)本為陰性,，待檢孔呈明顯黃色表示該標(biāo)本為陽(yáng)性,。

2．儀器判斷：以空白對(duì)照調(diào)零用酶標(biāo)儀于450nm（620nm作參比波長(zhǎng)）讀取O.D值，待檢孔O.D值大于陰性對(duì)照2.1倍者為陽(yáng)性,。當(dāng)陰性對(duì)照O.D值低于0.05時(shí)按0.05計(jì)算,。

●注意事項(xiàng)

1. 試劑盒在2-8℃下保存，每次取出時(shí)先平衡至室溫后使用,。滴瓶每次用后一定要將蓋擰緊,，各瓶蓋之間切不可混用。各試劑盒之間不可混用,。

2. 洗滌時(shí)將蒸餾水加滿(mǎn)孔內(nèi),，每次停放三十秒鐘，甩去孔內(nèi)液體,。禁用自來(lái)水等其它水源。

3. 為提高試驗(yàn)的可比性建議使用儀器判讀結(jié)果,，并對(duì)陰性對(duì)照測(cè)復(fù)孔以減少誤差,。

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