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MDA-MB-435 人乳腺癌高轉(zhuǎn)移細(xì)胞,ATCC 細(xì)胞|細(xì)胞系|細(xì)胞株|細(xì)胞培養(yǎng)條件：
*培養(yǎng)基：DMEM高糖培養(yǎng)基90%；胎牛血清10%,。
培養(yǎng)條件：37.0C carbon dioxide（CO2）,5%
MDA-MB-435 人乳腺癌高轉(zhuǎn)移細(xì)胞傳代方法： 收到細(xì)胞后,，取出培養(yǎng)瓶在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞生長情況。
（一）如果細(xì)胞未長滿,，用75%酒精噴灑整個瓶消毒后放到超菌臺內(nèi),，嚴(yán)格無菌操作，打開細(xì)胞培養(yǎng)瓶,，吸出培養(yǎng)液，僅留下10ml培養(yǎng)液在瓶內(nèi)繼續(xù)培養(yǎng),。
（二）如果細(xì)胞已長滿,，含即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。具體步驟如下：
1. 棄去培養(yǎng)液,，用PBS（不鈣,，鎂離子）洗1-2次。
2. 加1ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中,，倒轉(zhuǎn)放于37度培養(yǎng)箱1-3分鐘預(yù)熱,，然后又將培養(yǎng)瓶倒轉(zhuǎn)大約30秒后，在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,，若細(xì)胞大部分變圓分散,，輕敲幾下培養(yǎng)培養(yǎng)瓶，細(xì)胞隨即脫落下來,。
3. 加入6-8ml*培養(yǎng)基,，吸出，分到新的培養(yǎng)瓶中,。1:3~1:6傳代,；2~3天1次?！?/p>
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注意：傳代后一半用我們的培養(yǎng)基,，一半用你們的，以免細(xì)胞不適應(yīng)而造
成生長不好,。
凍存方法： 凍存液：基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
儲存：液氮儲存
