15
HMC 人腎小球系膜細胞
培養(yǎng)基和添加劑
RPMI 1640+10%胎牛血清或新生牛血清
HMC 人腎小球系膜細胞
傳代方法：
收到細胞后,，取出培養(yǎng)瓶在倒置顯微鏡下觀察細胞生長情況。
（一）如果細胞未長滿,，用75%酒精噴灑整個瓶消毒后放到超菌臺內,，嚴格無菌操作，打開細胞培養(yǎng)瓶,，吸出培養(yǎng)液,，僅留下10ml培養(yǎng)液在瓶內繼續(xù)培養(yǎng)。
（二）如果細胞已長滿,，即可進行傳代培養(yǎng),。具體步驟如下：
1. 棄去培養(yǎng)細胞隨即脫落下來液，用PBS（不含鈣,，鎂離子）洗1-2次,。
2. 加1ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中,，倒轉放于37度培養(yǎng)箱1-3分鐘預熱，然后又將培養(yǎng)瓶倒轉大約30秒后,，在倒置顯微鏡下觀察細胞消化情況,，若細胞大部分變圓分散，輕敲幾下培養(yǎng)培養(yǎng)瓶,，,。
3. 加入6-8ml*培養(yǎng)基，吸出,，分到新的培養(yǎng)瓶中,。1:3~1:6傳代；2~3天1次,?！?/p>
。
注意：傳代后一半用我們的培養(yǎng)基,，一半用你們的,，以免細胞不適應而造
成生長不好。
HMC 人腎小球系膜細胞
凍存方法： 凍存液：基礎培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
