產(chǎn)品簡介
詳細(xì)介紹
作為流式*的突破,,默克密理博旗下Amnis公司推出的FlowSight顯微成像流式細(xì)胞儀終于讓流式細(xì)胞儀睜開了“眼睛”,。它不僅能夠獲得大量細(xì)胞的群體分析數(shù)據(jù),而且還能夠?qū)崟r看到細(xì)胞圖像,,讓每一步的分析結(jié)果都可以通過圖像進行確認(rèn),。因此,它被生物通廣大讀者評為“2011生命科學(xué)創(chuàng)新產(chǎn)品”之一,。
FlowSight是下一代專家級流式細(xì)胞儀
FlowSight是一款體積小巧,,但是功能強大的下一代專家級流式細(xì)胞儀。該系統(tǒng)革命性地設(shè)計提高了信噪比以及熒光檢測的靈敏度,。標(biāo)配12個檢測通道,,除了傳統(tǒng)熒光強度信息,還能獲得“每個細(xì)胞”的明場,、暗場以及10個熒光圖像,。FlowSight可以多配置四根激光管(405, 488, 561, 642 nm),并加配785nm激光器于SSC信號檢測,,同時還可配置96孔板自動上樣系統(tǒng)(AutoSampler),。
的熒光靈敏度
FlowSight具有低于10MESF的超高檢測靈敏度,特別對于弱信號的檢測,,有明顯的優(yōu)勢,。下圖直方圖數(shù)據(jù)表明FlowSight能清楚分辨出Spherotech 8-peak calibration bead在FITC到Cy7通道上所有不同熒光強度微珠的熒光強度峰值。即使用小于5%的熒光強度激發(fā),,F(xiàn)ITC和PE通道也具有杰出的熒光強度分辨能力,。而紅色(PE-Cy5)和遠(yuǎn)紅外(PE-Cy7)通道對熒光峰值的分辨能力更是超過目前特好的流式細(xì)胞儀。
白細(xì)胞五類分群
FlowSight在混合細(xì)胞樣品分群方面具有的表現(xiàn),。右圖中應(yīng)用CD45和SSC作圖,,可以清楚地把人外周血單個核細(xì)胞(PBMC)區(qū)分成5個細(xì)胞群。
的785nm散射光激光激光器可以清晰的將嗜酸性粒細(xì)胞和噬中性粒細(xì)胞區(qū)分開,。
八色免疫熒光
FlowSight是將流式細(xì)胞儀和12通道圖像檢測結(jié)合起來的儀器,。多檢測通道的搭配,更多的激光器選擇以及自動熒光補償功能,,使復(fù)雜的細(xì)胞分群變得更加簡單,。
細(xì)胞周期細(xì)化分析
細(xì)胞周期分為間期(G1、S和G2)和有絲分裂期(細(xì)胞分裂階段,,M),。M期又分為前,、中、后,、末期,。細(xì)胞周期分析是流式細(xì)胞術(shù)常見的應(yīng)用之一。FlowSight只要利用DAPI染料標(biāo)記核酸,,根據(jù)DNA的凝集情況就可以利用細(xì)胞圖像對細(xì)胞周期進行精確分析,;同時突破傳統(tǒng)流式的應(yīng)用限制,進一步將M期分為四期,。
細(xì)胞壞死和凋亡的區(qū)分
傳統(tǒng)的流式細(xì)胞儀利用膜滲透性染料識別已經(jīng)死亡和發(fā)生凋亡而失去膜完整性的細(xì)胞,。但是,很難確定細(xì)胞死亡是通過凋亡的途徑還是壞死,。而FlowSight通過分析每個細(xì)胞核差異,,可以解決這個問題如下圖所示PI標(biāo)記的THP-1細(xì)胞,壞死的細(xì)胞維持完整的細(xì)胞核狀態(tài)而凋亡的細(xì)胞則出現(xiàn)皺縮和破碎現(xiàn)象,。
圖形量化分析應(yīng)用
核轉(zhuǎn)移的細(xì)胞信號檢測
圖形量化分析功能升級后包含核轉(zhuǎn)位程度的檢測向?qū)?,可以識別任意標(biāo)記的信號分子在細(xì)胞質(zhì)和細(xì)胞核之間的轉(zhuǎn)位過程。右圖的例子展示了轉(zhuǎn)錄因子NF-κB(綠色)從細(xì)胞質(zhì)到細(xì)胞核(橘紅色)轉(zhuǎn)位的過程,。對照細(xì)胞(左列)NF-κB主要定位在細(xì)胞質(zhì),,核轉(zhuǎn)位數(shù)值為陰性。激活的細(xì)胞(右列)NF-κB主要定位在細(xì)胞核,,核轉(zhuǎn)位數(shù)值為陽性,。
細(xì)胞自噬
細(xì)胞發(fā)生自噬時,,作為標(biāo)記物的細(xì)胞質(zhì)LC3蛋白經(jīng)過加工在自噬小體膜上大量聚集,。利用IDEAS軟件中的形態(tài)學(xué)參數(shù)——Bright Detail Itensity,能夠定量的衡量LC3-RFP熒光聚集的程度,,從而對細(xì)胞狀態(tài)進行量化分析,。如圖所示是饑餓引起的細(xì)胞自噬現(xiàn)象。正常細(xì)胞的自噬程度較低,、LC3-RFP聚集程度低(左圖),,當(dāng)收到外界因素,比如饑餓(右圖),、生理壓力,、藥物或者感染等刺激時,自噬程度會顯著提高,、自噬小體產(chǎn)生,,導(dǎo)致LC3-RFP聚集程度上升(右圖)。
圖形量化分析功能
量化的圖像分析加速您的科學(xué)發(fā)現(xiàn)
圖像量化分析功能(QI)升級包括光學(xué)系統(tǒng),、計算機系統(tǒng)和軟件系統(tǒng)的強化,,大大提高了FlowSight圖像獲取和分析能力,。同時QI也整合了功能強大而且直觀的圖像處理包,內(nèi)含超過百種量化分析參數(shù)和多種基于圖像分析應(yīng)用的優(yōu)化分析向?qū)?,?yīng)用于核轉(zhuǎn)位,、形變、內(nèi)吞,、細(xì)胞凋亡等分析,。