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中級(jí)會(huì)員 | 第15年

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徠卡生物顯微鏡的局限

時(shí)間:2013-9-10閱讀:1616
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徠卡生物顯微鏡的局限

徠卡生物顯微鏡的工作目標(biāo)是對(duì)樣品得到一個(gè)放大俄,使原來(lái)肉眼看不見(jiàn)的細(xì)節(jié)能變得清晰可見(jiàn),。這里有兩個(gè)基本的性能指標(biāo):一是分辨率極限,二是zui高有效放大倍數(shù),。分辨宰是分辨物體細(xì)節(jié)的zui小極限,。儀器可分辨的zui小細(xì)節(jié)經(jīng)適當(dāng)放大后,變成人眼所能看清者,。顯然,,如果超越了儀器分辨率的能力,即使進(jìn)一步提高放大倍數(shù),,也不能讓人清晰看到更小的細(xì)節(jié),。這種現(xiàn)象必須借助于光的波動(dòng)學(xué)說(shuō)來(lái)解釋。

徠卡生物顯微鏡中所用的可見(jiàn)光源是波長(zhǎng)為400一800nm的電磁波,。波傳播的特性之一是衍射,。衍射就是波遇到障礙物時(shí)能偏離直線傳播的性質(zhì)。根據(jù)基礎(chǔ)物理知識(shí)可知,,由于實(shí)際光學(xué)儀器都有限制光束的“窗口”(光學(xué)顯微鏡中的“窗口”就是物鏡邊緣所限制的透光范圍),,它造成的衍射效應(yīng)會(huì)使每個(gè)物點(diǎn)形成的像都是有所擴(kuò)展的衍射光斑??康锰南顸c(diǎn)彼此重登起來(lái),,會(huì)使畫(huà)面中的細(xì)節(jié)變得模糊不清。光學(xué)顯微鏡中還有一些像差(如球差和色差等)也會(huì)使像點(diǎn)展寬,,但它們大多可以校矯正,。所以衍射差就成了限制光學(xué)顯微鏡分辨率的*重要因素。

根據(jù)Huy8en分FmsMl原理可以得出:一個(gè)物點(diǎn)所形成的衍射像斑是一種強(qiáng)度大部分(約84%)集中在中心圓斑,,而周?chē)橛袕?qiáng)度逐漸減弱的若干離散同心環(huán)的衍射花樣,。中心圓斑(也稱(chēng)A卸因斑)的半徑。像方物鏡孔徑角或電子束半張角,。光學(xué)儀器中通常采用Rayl出gh

判據(jù)作為分辨率的標(biāo)準(zhǔn),,即當(dāng)一個(gè)囚斑像約中心剛好落在另一相鄰圓斑像的邊緣上時(shí),這兩個(gè)恰好能被分辨。因此圖像上可分辨的zui小距離眾就是Airy團(tuán)斑的半徑,。燈是顯微鏡物鎊所決定的圖像放大倍數(shù)),,便可以把像上的分辨率品轉(zhuǎn)換成對(duì)物方樣品的分辨率成。

備注:徠卡生物顯微鏡的局限的部分文章由北京中儀光科科技有限公司編輯整理上傳,。

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