徠卡共聚焦顯微鏡中細(xì)胞生物學(xué)功能

1．粘附細(xì)胞的分選：Meridian公司生產(chǎn)的ultMa型徠卡激光掃描共聚焦顯微鏡成侶儀是目前世界上*能對(duì)粘附細(xì)胞進(jìn)行分選的儀器,，而這種不改變細(xì)胞周?chē)囵B(yǎng)環(huán)境,、細(xì)胞鋪展程度相生長(zhǎng)狀態(tài)的分選方式是至關(guān)重要的,。它有兩種方式：一種是燦1ahon方式,，另一種是CookieCM小,。8方式,。

AN川on方式原理是,；在特制的培養(yǎng)皿上有兩類(lèi)細(xì)胞,，一類(lèi)是未作熒光染色的細(xì)胞群,，另一類(lèi)是作熒光染色的細(xì)胞群，利用高能激光把染色的細(xì)胞群殺死,，而把末染色的細(xì)胞群保留并且繼續(xù)培養(yǎng)．這種方式適用于數(shù)量較多細(xì)胞的分選,。

Co‘，k,；eCMuinR方式原理是：利用高能量激光：F底部帶膜的特制培養(yǎng)皿上在欲選細(xì)胞周?chē)懈畛砂私切?，而非選細(xì)胞則因在該幾何形狀之外而被除去，它適用于選擇數(shù)量較少的突變細(xì)胞,、轉(zhuǎn)移細(xì)胞和雜交瘤細(xì)胞,。

基于這兩種方法，徠卡激光掃描共聚焦顯微鏡能夠做到：⑦總體掃描細(xì)胞群,；⑦根據(jù)細(xì)胞

物理和少化特性進(jìn)行分選,；②對(duì)以百力分之‘機(jī)率發(fā)生的突變細(xì)胞進(jìn)行篩選；①不改變

細(xì)胞形態(tài),、類(lèi)型和活性而克隆細(xì)胞,；、員分離細(xì)胞亞群以進(jìn)行定量熒光分析,；⑥自動(dòng)儲(chǔ)分細(xì)胞位迎,，以對(duì)待定細(xì)胞進(jìn)行重復(fù)測(cè)定。

2．激光細(xì)胞顯微外科及光陷阱技術(shù)：激光掃描共聚焦顯微鏡可將激光作“光子刀”使用，以完成細(xì)腦膜瞬間穿孔,，線粒體,、溶酶體等細(xì)胞器燒灼，染色體切割,、神經(jīng)元突起切除等一系列細(xì)胞外科于術(shù),。

光陷阱（opticnltr，p）技術(shù)是利用激光的力學(xué)效應(yīng),，將一個(gè)微米級(jí)大小的細(xì)胞器或其以村6鉗制于激光束的焦平面,，也可稱(chēng)為光鉗?？衫霉忏Q技術(shù)來(lái)移動(dòng)拙胞的微小別粘和結(jié)構(gòu)（如染色體,、細(xì)胞器）、進(jìn)行細(xì)胞融合,、機(jī)械刺激及細(xì)胞骨架彈性測(cè)址等,。

3.熒光光漂白恢復(fù)（FR八P）技術(shù)：此技術(shù)借助于高強(qiáng)度脈沖式激光照射細(xì)胞的某一區(qū)域，從而造成該區(qū)域熒光分子的光淬火,，該區(qū)域周?chē)軫淬滅熒光分子將以一定速率向受照區(qū)域擴(kuò)散,，用激光掃描共聚焦顯微鏡可邑接對(duì)此擴(kuò)散速率進(jìn)行監(jiān)測(cè)．由此揭示細(xì)胞結(jié)構(gòu)和各種變化的機(jī)制，因而可用以研究細(xì)胞骨架構(gòu)成,、核膜結(jié)構(gòu)和大分子組裝等,。

4．胞間通訊的研究：動(dòng)物細(xì)胞中縫隙連接介導(dǎo)的胞間通訊被認(rèn)為在細(xì)胞增殖和分化中起著非常重要的作用。徠卡激光掃描共聚焦顯微鏡通過(guò)測(cè)量細(xì)胞縫隙連接介導(dǎo)的分子轉(zhuǎn)移,，觀察相鄰細(xì)胞之間的胞間通訊,。可用于研先腫瘤啟動(dòng)因子,、生長(zhǎng)因子以及細(xì)胞內(nèi)物”,、pH相cAMP對(duì)縫隙連接祁胞間通訊的影響。

5．細(xì)胞膜流動(dòng)性測(cè)定：細(xì)胞膜熒光探針受到極化光線激發(fā)后,，其發(fā)射光極性依賴(lài)于熒光分子的旋轉(zhuǎn),，而這種有序的運(yùn)動(dòng)自由度依賴(lài)于熒光分子周?chē)哪ち鲃?dòng)性，故極性測(cè)員叮間接反映細(xì)胞膜的流動(dòng)件,。因此,，通過(guò)計(jì)算機(jī)軟件，徠卡激光掃描共聚焦顯微鏡可對(duì)細(xì)胞膜的流動(dòng)性進(jìn)行定量和定性分析,。這種膜流動(dòng)件測(cè)定在膜的磷脂酸織成分析,、藥物效應(yīng)和作用位點(diǎn)、溫度反應(yīng)測(cè)定及物種比較等方面有重要作用,。

備注：徠卡共聚焦顯微鏡中細(xì)胞生物學(xué)功能部分文章由北京中儀光科科技有限公司編輯整理上傳。