徠卡激光掃描共聚焦顯微鏡

值孔徑的透鏡。此后不久,，這項(xiàng)技術(shù)在醫(yī)學(xué)和生物學(xué)中得到應(yīng)用,。

1979年，凱斯特（Koest曰）設(shè)計(jì)了一種徠卡共聚焦顯微鏡,，為此他獲得了美國,。198l年，維納恩茲•范•雷桑持（W加aed銘vanResnmt）*次成功地演示了用熒光探針標(biāo)記的生物材料的光學(xué)橫斷面,，它標(biāo)記著所有的關(guān)鍵技術(shù)已經(jīng)成熟,。同年，范德•威歐瑞特（vaa』erVoon）全面地描述徠卡激光掃描共聚焦顯微鏡,。他認(rèn)為一套高質(zhì)量的重視日常激光掃描共聚焦顯微鏡必須包括：標(biāo)準(zhǔn)消像差和色差的光學(xué)透鏡、高靈敏度的探測器,、產(chǎn)生特定波長的功率不太小的激光器,、高速度大容量的微機(jī)系統(tǒng)和掃描控制裝置。

早期的徠卡激光掃描共聚焦顯微鏡采用狹縫掃描,，它的待點(diǎn)是掃捆速度較快,，適合實(shí)時觀察動態(tài)標(biāo)本。但是內(nèi)于顯微鏡的物鏡存在著軸外傷差,，并且用狹縫掃描時在平行狹縫e1光軸平面亡沒有共聚焦原理,，所以得到的共聚焦圖像的清晰度和質(zhì)量都受到影響。另外,，由于一般徠卡顯微鏡存在著紫外色差,、所以不可以用紫外光做為熒光激發(fā)的光源，但是由于

它的掃描速度快,，結(jié)構(gòu)簡單,，價格便宜，所以還是有一定的使用價值,。

為了克服早期徠卡共聚焦顯微鏡的缺點(diǎn),，后來的采用臺階掃描技術(shù)提高成像質(zhì)量。它的原理是掃描時光欄（用孔光欄代替狹纏）不動，靠移動工作臺讓物體一點(diǎn)一點(diǎn)被掃描,，這樣成驚光束永遠(yuǎn)是軸上的,、沒有軸外傷差。另外有些儀器上還加了滬紫外色差的切換裝此,，這種儀器的圖像質(zhì)量相功能比以前有人的改進(jìn),。隨之而來的缺陷也很嚴(yán)重：婦報(bào)時必須把標(biāo)本固定死，以于使它的掃描速度比以前慢得多．所以方法實(shí)時地觀察活標(biāo)本,。

在使用較多的是光束掃描器,，即驅(qū)動激光束扛描標(biāo)本。它具安足夠伙的速度,，可滿足共聚焦系統(tǒng)的要求,。光束列描器包括：單光束、多）t束,、狹縫扣擬器,。單光束們描器性能．狹繼掏描器雖具有產(chǎn)生圖像的zui高速度．但是與單點(diǎn)掃描器帕比，信噪比較低,，這

是由J,；從散焦區(qū)來的沒肘光不能被有效的檔住．另外在其分辨率本領(lǐng)廠有內(nèi)部的不平衡性,。多光束掃描器由電動馬達(dá)帶動N1pk‘’v盤旋轉(zhuǎn)而完成,。

從發(fā)展過程來看．成像質(zhì)量與掃描速度始終是相互矛盾的。各廠家在此方面曾想盡辦法努力解決,，比如MerEd,，an公司推出成鐐質(zhì)垃較高的U比ma如激光掃描共聚焦顯微鏡祁掃描速度zui快的In，Ight型激光掃描共聚焦顯微鏡,，而Nikon公向則利用自家光學(xué)設(shè)計(jì)的優(yōu)勢．研制出產(chǎn)品“水鏡”來代替以柞的物鏡,，取得較好的結(jié)果。公司*家推出共聚焦物鏡CN．ANAP（）CHIMAT40x／1．2w*zui近又推出C—PI‘ANAP（）63X／1．2w水鏡,，該水鏡有一調(diào)節(jié)環(huán),，可修正閻水浸活休的不同深度所帶來的球差，其紫外通過率南,，大大提高了成像質(zhì)量,。zeM公司也是世界r1*家奉公司白行設(shè)計(jì)的“體視激光掃描共聚焦顯微鏡，使系統(tǒng)性能達(dá)到高度的協(xié)調(diào)同一,。N,。—Red公司傘產(chǎn)的激光扣描共聚焦顯微鏡，出于其產(chǎn)品價廉物美．目前在世界上占有率較高,。

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