奧林巴斯熒光顯微鏡——光學(xué)部件
奧林巴斯熒光顯微鏡——物鏡
奧林巴斯熒光顯微鏡通常備種物鏡均可應(yīng)用,,但為了提高熒光圖象的亮度,,應(yīng)盡可能提高物籬的數(shù)值孔巴X.A,,故采用一些特殊玻璃或結(jié)構(gòu)的物洗裝備于熒光顯極統(tǒng),。如西德OFTON廠的熒石物鏡和單色透紫外物鏡等,,它們的數(shù)值孔徑N.A往往比同答焦距的消色差物笛的數(shù)值孔徑高15—30%,。由標(biāo)本圖象的亮度是與物鏡數(shù)值孔徑N.A的平方成正比,,而與放大倍數(shù)成反比,因此使用時應(yīng)注意這一點(diǎn),。
的物鏡,,若使用短波紫外線為激發(fā)光叭其鏡片必須能透過紫外線,而且在光源的激發(fā)下不致發(fā)生熒光,,另外貿(mào)片的膠合也不能用冷杉樹脂肢(加拿大膠),,因它會發(fā)生輕度的焚兒所以一定要用合成膠,如聚乙烯醇之類,。
——目鏡
在中,,基于上述原因,盡量考慮避免在光路中的光線損失,。
——標(biāo)本
為保證鏡檢的效果,,對標(biāo)本設(shè)置也應(yīng)有所注意。
·載殃片奧林巴斯熒光顯微鏡如用短波紫外光為激發(fā)光時,必須各有能透過續(xù)外線的載玻片,,其厚度約為o.8—1.2mm,,以免致吸收過多,且易于使激發(fā)光在標(biāo)本面上聚焦,,否則,,對使用暗場霞光器影響較大。另外,,戴玫片必須光潔,,厚度均勻無油邊、無劃痕,。
·蓋玻片
為加強(qiáng)激發(fā)光,,可用干涉差玻爾這種蓋玻片的表面鍍有若干層對不同波長的光而起不同干涉作用的物質(zhì),如mspz(氟化鎂)它可以透過熒光,,而反射激發(fā)光。這種激發(fā)光又可激發(fā)標(biāo)本,。
·標(biāo)本的標(biāo)本不能太民散樣要均場其目的使標(biāo)本能
得到充分激發(fā),,另外避免紉跑重疊或雜質(zhì)掩蓋,影響判斷,。
·封栽劑的封載劑必須無熒光,、無顏色。通常使用優(yōu)級分析純比油鹽水緩沖浪(90%七油,、lo%磷酸鹽緩沖水,,pH7.1—8.6)。為了固定蓋玻片,,可用o.5%明膠,,加到破片后以10%福爾馬林因免也可用淀粉營。長期保存的標(biāo)有可用二甲苯混合封栽劑,,如DPX(即酞酸二丁朗10毫升,、聚苯乙烯25克,二甲苯70毫升混合而成),。
·澆油原則上的入鏡油本身必須不受激發(fā)光,。因此普通顯微鏡所用的香柏油不能直接陵用,必須加入一定量的硝基苯(熒光熄滅劑)才勉強(qiáng)用,,但這樣往校會減弱標(biāo)本本身的熒光因此效果不佳,。純松香油無固有熒光,可以使用,。液體石臘和純甘油(加10%磷酸緩沖鹽水)是比較好的代用品,,它們都可以用水洗比用起來很方便,只是折光串較仇對圖象質(zhì)量略有影響,如果配合使用勝油浸液物鏡那就更好了,。