生物顯微鏡微生物污染的檢測(cè)

污染的潛在來(lái)源是多方面的,，如來(lái)自用具、室內(nèi)空氣,、工作臺(tái)面,、組織樣品v溶液，以及操作過(guò)程等,。因此必須盡量小心地去避免它,。然而，即使是zui的實(shí)驗(yàn)室,，也準(zhǔn)免不發(fā)生污染。因此,。要經(jīng)常進(jìn)行檢測(cè),，爭(zhēng)取盡早發(fā)現(xiàn)，及時(shí)排除,，防止擴(kuò)大污染,。

建議采用如下步驟檢測(cè)：

（1）用肉眼或生物顯微鏡檢查各步驟的污染。每2—3個(gè)月核查一次支原體（如果是原代培養(yǎng),，則2—3周核查一次）,。

（2）如懷疑有污染,，但仍不明顯，又沒(méi)有證明,，除懷疑的培養(yǎng)物和吸管外,，先將工作罩子和工作臺(tái)面清潔消毒。然后,，待所有的培養(yǎng)工作操作步驟結(jié)束后,，取懷疑培養(yǎng)物樣品．摘在載敢片上，在生物顯微鏡下仔細(xì)檢查,，用位相差顯微鏡進(jìn)行檢查,。如證明有污染，將吸管丟棄,，用70%酒精按沈罩子和工作臺(tái)面,，30分鐘后再使用。

（3）將污染性質(zhì)記錄在登記卡上,。

（4）如果是新的污染,，又是局部污染，沒(méi)有擴(kuò)散,，則將污染培養(yǎng)物,、用來(lái)接種污染培養(yǎng)物的培養(yǎng)瓶和其他用于此培養(yǎng)的胰蛋白酶瓶子等丟棄到消毒劑中去，在組織培養(yǎng)區(qū)外的毒氣罩內(nèi)操作,。

（5）如果是新的污染,，而且是散播的，即至少在兩個(gè)不同培養(yǎng)物中均發(fā)現(xiàn)有的,，應(yīng)把所有的培養(yǎng)液,、母液以及胰蛋白酶等均丟棄。

（6）如果類似污染重復(fù)出現(xiàn)．則檢測(cè)母核是否污染,?？刹捎玫臋z測(cè)法：1）單獨(dú)濕育或在營(yíng)養(yǎng)肉湯中溫育；2）鋪在營(yíng)養(yǎng)瓊脂板（Difco）上,；3）假如上述兩個(gè)方法均末檢測(cè)出來(lái),，但仍有懷疑時(shí)，則取100m1,，通過(guò)0.2μm濾膜過(guò)濾,，然后將濾膜鋪在營(yíng)養(yǎng)瓊脂上溫育。

（7）如果污染不但廣泛散播,，又是多品種的,，而且重復(fù)再現(xiàn)，則需要檢查消毒步驟，即烘箱和蒸氣消毒鍋的溫度,、消毒時(shí)間,、包裝和貯存方面是否有問(wèn)題．以及房間消毒和超凈

工作臺(tái)的垂直層流的過(guò)濾器是否失效。

（8）不要企圖清除污染物的污染,，除非它們是*的培養(yǎng)物,。清除污染可以：1）用

合有比正常濃度高的抗生素的B5s清洗培養(yǎng)物，清洗5次,；2）加抗生素到培養(yǎng)液中,，放置48小時(shí)。如果可能,，可檢測(cè)污染物對(duì)四一種抗生累比較敏感53）除去抗生素,。在不加抗生素情況下培養(yǎng)2周，核查污染是否已被清除,。

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