徠卡熒光顯微鏡——熒光顯微鏡的持點

徠卡熒光顯微鏡是普通顯微術(shù)的重大發(fā)展。它具有*的*性,。徠卡熒光顯微術(shù)是在黑閱內(nèi)背景下觀察標‘杠的形色圖象,，有良好的反劉，故觀察清楚,、方便，易哥：鑒別，眼睛也不會疲勞,。由于熒光染色素的濃度極稀（儀1：Iooo00）便能發(fā)出明亮的熒光,，因此一般油機體眾說是無動的,，為活體觀察，如研究功能器官的過程和細微糾構(gòu),，某些代謝過程的變化等,，提供了廣泛的可能性。另外,，英光色素染色法比較簡軋時間路標木制作客只,，特別適于快速工億如傳染病的快速診斷等,。

徠卡熒光顯微鏡的熒光顯微術(shù)可用明視場改暗視場方洗，但—般用睹權(quán)場效果較好,，因為它產(chǎn)生的現(xiàn)場背景是黑的,，圖象反襯強，過沒有明視場方便,。至于透射熒光還是反射熒光,，一般來說，反射熒光應用范圍廣一以它不僅適用觀察普通標刺,，而且還能現(xiàn)察不適明標本,。

徠卡熒光顯微鏡根據(jù)激發(fā)光波長的特點，熒光顯微術(shù)可用紫外光或紫藍光激發(fā),。蒙外光的特點在觀察機體組織的自體熒光＜如核酸及金剛石等）在組織華工d：中便于區(qū)別背景熒光和染色目標的熒光,。但陜點是：常常會引起標4；熒光的光致淬滅,，標本難以重復觀察,，并且沙顯微攝影發(fā)生團難。另外對活體標本有叨顯的殺傷作用,，對長期從事這項工作人員的暇睛也有傷害,。特別是對絕大多數(shù)的熒光色素來說，紫外區(qū)不是zui大的光譜吸收風因而不能得到先分的激發(fā),。而紫藍光卻沒有以上—些缺點,，但不足的是不能激發(fā)組織的自體熒光，因此不適于研究組織的白體熒光結(jié)構(gòu),。

徠卡熒光顯微鏡對于個別焚光色素,，知羅達明R200，可用波長更長的藍綠光作為激發(fā)光為依,。

結(jié)果徠卡熒光顯微鏡所觀察的熒光圖象,，主要以兩個指標：劉斷結(jié)果，一是形態(tài)學特征,，二是熒光的亮度,。在免疫焚光工作巾，尤其是這樣,，必須將兩者結(jié)合起來綜合判斷不可偏皮,。糾果記錄是根據(jù)主觀指標或客觀指標，但一般常是憑工作者日力觀察的主觀指標由于這是定性的觀察,，所以記錄的度較差,。隨著科學校木的發(fā)展，采用客觀指標記錄結(jié)果巳開始應用。

①用不同序度的中性濾片插入激發(fā)濾片和標本之間的光路中,，以看焚光減駒的極度,；

②不同標本以相同的隕光時間進行顯檄攝影，然后用光密度計測定膠卷圖象,；

③直接用熒光計測熒光色素和兔疫熒光染色的鏡下標本,，

④用光敏電池漏光表Z；愧網(wǎng)象的亮度,，或者與掃描裝置結(jié)備對視場的特定部位進行掃描等,，如熒光顯微光度計。

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