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徠卡顯微鏡-精子檢查
一、操作程序簡(jiǎn)述
1濕法分析包括下列內(nèi)容:①濁度,,②凝集,;②精子計(jì)數(shù)及其活動(dòng)力評(píng)估o
2.活動(dòng)擺子百分率及其動(dòng)力學(xué)測(cè)定①主觀方法;②客觀方法,。徠卡顯微鏡
3.稿子計(jì)數(shù)①血細(xì)胞計(jì)數(shù)器,;②Msrkler計(jì)數(shù)池,;③計(jì)算機(jī)輔助的精液分析(con-Puter-assistedsemenanalysis,CASA)。
4.制備精液讀片桔液涂片,、精液染色,、形態(tài)學(xué)分析。
在確定精子數(shù)量和活動(dòng)力過程中,,無論采用何種技術(shù),,對(duì)每一個(gè)精液樣品均需用濕法或“濕操作”.此法將使檢驗(yàn)人員對(duì)稿于計(jì)致、活動(dòng)情況和有關(guān)動(dòng)力學(xué)具有一個(gè)初步的主觀印象,,并可測(cè)定濁度和強(qiáng)度,;在測(cè)定稿子計(jì)數(shù)及其活動(dòng)力過程中,溫度顯得很重要,。顯然,,37°是*選擇;然而,,如缺乏調(diào)節(jié)溫度的顯微鏡操作臺(tái),,整個(gè)分析過程要在此條件下完成是不可能的。通常.精液分析在室溫中進(jìn)行,。正如人們所知.室溫變化范圍很大,,因此,必須盡量控制操作區(qū)域的溫度,。
(一)方法
精液*液化后,,充分混勻,加一滴未稀釋桔液于干凈玻片上,,蓋上蓋玻片,。也可用自動(dòng)加樣器吸lo微升精濃加至載玻上以提高測(cè)定的可重復(fù)性。在放大200—400倍(高倍鏡)的情況下觀察20個(gè)視野,,評(píng)價(jià)活動(dòng)稻子的百分率,、相對(duì)運(yùn)動(dòng)速度和方向以及每一高倍視野下的精于數(shù),評(píng)價(jià)其濁度和是否有凝塊,,確定“圓形細(xì)胞”(未成熟微生物細(xì)胞和白細(xì)胞)的百分率,。
(二)濁度
顯然,成熟館子在精掖中占多數(shù),。但有時(shí)也會(huì)發(fā)現(xiàn)其他細(xì)胞或碎片,。來自男性生殖道的亡皮細(xì)胞也會(huì)存在于精液中。在高倍鏡下,,偶爾發(fā)現(xiàn)上皮細(xì)胞并非病理指征,。但息尿道炎的男子其棺液中可出現(xiàn)大量上皮細(xì)胞;有時(shí)亦可見陰道源性的上皮細(xì)胞,,這種情況表明俏液樣品是經(jīng)性交中斷法收集的.此類細(xì)胞應(yīng)在報(bào)告單上注明,。徠卡顯微鏡
不成熟的病原茵細(xì)胞和白細(xì)胞也常在精液中出現(xiàn),,在染色破片上難以區(qū)別,而應(yīng)用濕法操作法則更不可能,。通常用巴氏(Papnicolaou,,PAP)染色來觀察這種“圓形細(xì)胞“(大于或等于成熟稻子的10%);而濕法分析有助于確定哪些樣本需用這一方法進(jìn)一步制備,。應(yīng)對(duì)白細(xì)胞的確切數(shù)目和不成熟病原茵的百分串加以確定和記錄(詳見后述)。
在精液中,,還可能出現(xiàn)其他顆粒性物質(zhì)如梢膚結(jié)晶,、滑石粉和殺桔劑顆粒,如發(fā)現(xiàn)量很大,,則應(yīng)加以記錄,。粗大茵體、毛滴蟲,、念珠菌更應(yīng)加以報(bào)告,。
(三)凝集
徠卡顯微鏡在某些(非全部)含抗精子抗體的桔液樣本中,精于可能發(fā)生自發(fā)性凝集,,應(yīng)在主觀判斷的基礎(chǔ)上加以報(bào)告并記錄凝集類型和程度,,凝集程度的評(píng)價(jià)用0-Ⅳ表示(表44)。精子凝集方式注明為:頭—頭,、頭—尾,、尾—尾或混合型。有時(shí)出現(xiàn)格子粘附于碎片或其他顆粒性物質(zhì)的現(xiàn)象,,應(yīng)與真性凝集區(qū)別開來,。這種現(xiàn)象除非根嚴(yán)重,否則一般不作報(bào)告,。出現(xiàn)精于凝集提示應(yīng)作特異性抗精子抗體的檢測(cè)(見有關(guān)章節(jié)),。
(四)評(píng)估精于數(shù)、活動(dòng)率及其動(dòng)力學(xué)
在精液分析報(bào)告中應(yīng)記錄棺子數(shù),,避免出現(xiàn)少數(shù),、幾個(gè)、很多,、大量館子等主觀性估計(jì),。但是,如果每高倍視野觀察到大量精子而實(shí)際計(jì)數(shù)所反映數(shù)量有所下降,,應(yīng)該懷疑結(jié)果的難確性,,并重新化驗(yàn);徠卡顯微鏡此外,,還應(yīng)對(duì)精子活動(dòng)串(25%,、50%,、75%或大于80%)和動(dòng)力學(xué)特征(緩櫻隨意運(yùn)動(dòng)和快速直線運(yùn)動(dòng))作出主觀評(píng)價(jià),并與以客觀方法測(cè)定的結(jié)果相比較,。顯然這種方法的主觀性很強(qiáng),,在測(cè)定者之間甚至同一測(cè)定者身上易產(chǎn)生差異。然而,,這些“主觀的粗略分析”常會(huì)提示客觀分析方法的潛在錯(cuò)誤,。
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