生物顯微鏡-細胞大小的測量

一,、實驗目的

1學會測微尺的使用和計算方法,。

2．掌握鴨血細胞大小測定的方法,。

二,、實驗原理

應用顯微鏡的成像原理,，同時借助生物顯微鏡的鏡臺測微尺和目鏡測微尺,，兩尺配合使用．進行測量和運算，得出細胞的大小,。

鏡臺測微尺是小央部分副有等分線的載玻片,。一般將1mm等分為100格(或2mm等分為200格)，每格長度等于0.01mm(即10μm),。是于校正目鏡測微尺誨格長度的,。

目鏡側微尺是一缺可放在接目鏡內的隔板上的圓形小玻片，其中央刻有的刻度,，有等分50小格或100小格兩種,，每5小格間有一長線相隔。由了所用接目鏡放大倍數和接物鏡放大倍數的不同．目鏡測微尺每小格所代表的實際長度也就不同,，因此,，目鏡測微尺石能直接用來測量微生物的大小，在位用前必須用鏡臺測微尺進行校正,，以求得在一定放大倍數的接目鏡和接物鏡廠該日鏡測微尺每小格的相對值．然后才可用來測量微牛物的大小,。

三、實驗用品

1．儀器

(1)目鏡測微尺(2)鏡臺測微尺(3)生物顯微鏡(4)擦鏡紙

2．試劑勺材料

(1)鴨血細胞涂片(2)香柏油(3)瑞氏—古姆薩染液(4)15mol／L硼酸緩沖液(5)生理鹽水(6)蒸餾水(7)二甲苯

四,、實驗方法與步驟

1．目鏡測微尺的標定

(1)放置目鏡測微尺取小接目鏡,，旋開接目鏡透鏡．將目鏡測微尺的刻度朝下放在接目鏡筒內的隔板上，然后旋上接目透鏡,，zui后將此接日鏡插人鏡筒內。

(2)放置鏡臺測微尺將鏡臺測微尺置于顯微鏡的載物臺卜,，使刻皮面朝上,。

(3)校正生物顯微鏡目鏡測微尺先用低倍鏡觀察,，對準餒距，當看清攪臺測微尺后,，轉動接口鏡,，使目鏡測微尺的刻度與鏡臺測微尺的刻度平行，移動推動器,，使目鏡測微尺和笛臺測微尺的某一區(qū)間的兩對刻度線*重合,，然后計數出兩對重合線之間各自所占的格數。

根據計數得到的目鏡側微尺和鏡臺側微風至合線之間各自所占的格數,，通過如下公式換算小目鏡測微尺每小格所代表的實際氏度,。

同法校正在高倍鏡和油鏡下目鏡測微尺每小格所代表的長度。

2．鴨血細胞大小的測定

(1)將已經制備好的鴨血涂片放在染色盤梁上,，滴數滴瑞氏—吉姆薩染液欲涂片上色1分鐘,，滴加等量1／15mol/L磷酸緩沖液，用茍,；簽輕輕攪拌混勻,，再靜置染色5—10分鐘清水緩緩沖洗1分鐘，傾斜放量．晾十后進行觀察測量,。

(2)生物目鏡測微尺校正后,，移去鏡臺測微尺，換上鴨血涂片,，校正焦距使細腦清晰,，轉動目鏡測微尺(或轉動染色標本)，測出鴨血細胞的長和寬各占幾小格,，將測得的格數乘以目鏡側微尺每小格所代表的長度,，即可換算出此單個細胞的大小值。

在側量時應注意將被測量的標本移放到視野中心,，因為在這個位置上鏡像zui消晰,，像茹也zui小，為減少誤差,，在測量間一被揪物時,，要逗3次以上，采用其平均值,。還要注意視野中的先度應均勻勁,，以免標尺分度左右兩側的亮度不同而影響肺確測量值的得州。

3．取以目鏡側微尺,，將接目鏡放凹鏡筒,，再將懶境側微尺和鏡臺洲微尺分別用挨鏡紙擦拭后，放間盒內保存,。

注意事項：不同物鏡下口鏡測微尺代表的大小不同,。

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