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生物顯微鏡的使用（下）

（三）反射鏡、費(fèi)光器的使用方法和對(duì)光方法

1．調(diào)光

對(duì)采用反射鏡的顯微鏡,，一般都使用平面反射鏡去反射太陽(yáng)的散射光,。只有在光線不足或窗外有干擾時(shí)，才使用凹面反射鏡,。采用電光源的顯微鏡,，將光亮調(diào)合適即可c

2．聚光器的用法

（1）聚光器高度的調(diào)節(jié)。

一般的聚光鏡．在平行光照射的情況下,，其焦點(diǎn)落在它上端透鏡平面中心上方約1.25mm線,。當(dāng)使用高倍鏡或油鏡時(shí),，內(nèi)于放大率大，鏡像亮度小,，需要較強(qiáng)的照明,。因此，應(yīng)把聚光器升至zui高,，以便使聚光鏡的焦點(diǎn)正好落在標(biāo)本平面亡,。侗在使用低倍物鏡時(shí)，可將聚光器適當(dāng)下降,。

（2）可變光闌的用法,。

可變光欄起兩個(gè)作用。一是控制射向標(biāo)本的光通量,；二是改變聚光器的數(shù)值孔徑,。在這兩個(gè)作用中，后者是主要的,。為了使物鏡的分辨率得到充分的利用,，從原則上說(shuō)，聚光器的數(shù)值孔徑應(yīng)與物鏡的相同,。否則,，分辨率或清晰度會(huì)受影響。

3．對(duì)光方法

對(duì)電光源顯微鏡來(lái)說(shuō),，使用時(shí)只要將光調(diào)節(jié)合適的亮度即可,，不需要進(jìn)行對(duì)光。但對(duì)使用自然光的低檔顯微鏡來(lái)說(shuō),，要想獲得良好的觀察效果,，必須充分利用照明光線。因此,，鏡檢之前應(yīng)先對(duì)光,。對(duì)光時(shí)，將低倍鏡旋入光軸,，聚光器適當(dāng)升高,，可變光闌開(kāi)

至zui大。然后,，從目鏡中觀察,，同時(shí)轉(zhuǎn)動(dòng)反射鏡．直至視場(chǎng)zui明亮、zui清晰為止,。如果利用自然光,，則應(yīng)盡量躲避窗框和窗外樹(shù)枝的干擾。

（四）物鏡的正確調(diào)焦

對(duì)光完成后或調(diào)節(jié)合適光亮后,，升高鏡簡(jiǎn)或降低載物臺(tái),，將標(biāo)本玻片夾在移動(dòng)器即標(biāo)本夾上,，并將欲檢查的部分移至載物臺(tái)通光孔的中央，然后開(kāi)始調(diào)焦,。

無(wú)論作何種檢查,，均應(yīng)從低倍鏡開(kāi)始。調(diào)焦時(shí),，先用粗動(dòng)手輪將鏡筒下降．使低倍鏡的前透鏡與蓋玻片之間的距離略小于該物鏡的丁作距離（5mm以下）,。為了避免物鏡壓在標(biāo)本玻片上，可從側(cè)面窺視,。然后，一邊從目鏡中觀察視野,，一邊利用粗動(dòng)手輪將鏡筒徐徐上升,，待初見(jiàn)物像后．改用微動(dòng)手輪作精細(xì)調(diào)焦，直至物像zui清晰為止,。低倍物鏡的視場(chǎng)大,，有利于觀察標(biāo)本的全貌。也可利用移動(dòng)器或縱,、橫向調(diào)節(jié)手輪尋覓所觀察的目標(biāo),。如有必要，可將尋得的目標(biāo)移至視場(chǎng)的中心,，為高倍鏡觀察做好準(zhǔn)備,。

從低倍物鏡轉(zhuǎn)換為高倍物鏡時(shí)，如果物鏡是顯微鏡的原配,，所用的載玻片,、蓋玻片又符合標(biāo)準(zhǔn)，一般都可以進(jìn)行“等高轉(zhuǎn)換”,。即轉(zhuǎn)換后,，只要稍微調(diào)節(jié)一下微調(diào)旋鈕．即可看到清晰的圖像。但油鏡不強(qiáng)求齊焦,，先將鏡筒升高后再轉(zhuǎn)換,，zui后按低倍鏡的調(diào)焦方法重新調(diào)焦。

使用油鏡的方法如下：先將鏡筒升高,，取下標(biāo)本玻片,，稍稍降低聚光器，并在聚光器的鏡頭上滴兩滴香柏油（油小不應(yīng)有氣泡,。如有,，可用小木簽扎破），再將標(biāo)本玻片放回原處,，把聚光器升高,，使載玻片的底面與香柏油接觸,。這樣，就完成了聚光鏡的伯浸,。接著,，在蓋玻片上滴上1滴香柏油。然后從側(cè)面窺視．利用粗調(diào)使鏡筒盡量下降,，直至油鏡的前透鏡浸沒(méi)在香柏油中（但尚未接觸玻片）,。這樣，又完成了物鏡的油浸,。然后,，一邊從臼鏡中觀察．一邊利用微動(dòng)手輪將鏡筒緩緩上升（注意不要擰錯(cuò)了方向，壓碎蓋玻片）．直至視野中出現(xiàn)zui清晰的物像為止,。

聚光鏡的油浸,，還可以采用另一種滴油方法，即不直接把油滴在聚光器的鏡頭上,，而是把載玻片翻過(guò)來(lái),，將油滴在載玻片的底面上，然后再翻過(guò)去,，對(duì)準(zhǔn)放置于聚光器上面,，再使聚光器上升，來(lái)完成聚光器的油浸,。這種方法雖然不那么順手,，但比較安全。有人使用玻璃棒直接與聚光鏡接觸來(lái)涂抹香柏油．這種方法容易劃傷鏡片,，不宜采用,。

在使用油鏡時(shí)，允許在聚光鏡與標(biāo)本之間不加香柏油,，即聚光鏡上仍以空氣為介質(zhì),，但這會(huì)犧牲物鏡的分辨率。

如用油鏡觀察后,，又需要轉(zhuǎn)回高信物鏡觀察,，應(yīng)將蓋玻片上的油擦去，以免站污高倍物鏡,。但聚光器廣的油可以石擦,，只要把光闌適當(dāng)縮小一點(diǎn)即可。

油鏡使用完畢,，要及時(shí)將香柏油擦拭干凈,。鏡頭上可先用干凈的擦鏡紙擦I—2次，把大部分的油擦掉,。然后用二四苯滴濕的擦鏡紙擦2次,，zui后用擦鏡紙擦干凈即可,。聚光鏡的擦拭方法與此相同。如標(biāo)本需要保存,，玻片上的香柏油可用“拉紙法”擦拭干凈,。即將擦鏡紙覆蓋在玻片上，在紙上滴上—滴二甲苯．趁濕將紙條平拖著拄外拉,，連續(xù)幾次即可擦干凈,。

在整個(gè)調(diào)焦過(guò)程中（尤其是高倍物鏡和油鏡的調(diào)焦），每個(gè)動(dòng)作都要緩慢進(jìn)行,。否則,，物像一閃而過(guò)，找不到觀察的目標(biāo),。

備注：禁止轉(zhuǎn)載復(fù)制生物顯微鏡的使用（下）文章http://www.cnnoptics.com/