一,、保護(hù)柱的選擇
選擇保護(hù)柱的原則是：在滿足分析分離要求的前提下，盡可能的選擇較短的保護(hù)柱結(jié)構(gòu),，對(duì)分離樣品有比較小的保留性的色譜填料,。
在選擇保護(hù)柱之前首先要考慮的是樣品是否清潔。對(duì)于大部分分析工作來(lái)說(shuō),，一支1cm長(zhǎng)的保護(hù)柱便能提供充分的保護(hù)作用,。但是，如果樣品非常不清潔,，或工作中要經(jīng)常更換保護(hù)柱,，那么就應(yīng)該選擇2cm或3cm長(zhǎng)的保護(hù)柱。但是,，隨著保護(hù)柱的加長(zhǎng),，保留時(shí)間也會(huì)變長(zhǎng)。
保護(hù)柱的內(nèi)徑應(yīng)與分析柱的內(nèi)徑相同或相當(dāng),。保護(hù)柱的填料裝填方式也很重要,。目前有薄膜裝填法的保護(hù)柱，使用過(guò)程很簡(jiǎn)單方便,，而且可以在實(shí)驗(yàn)室中進(jìn)行干裝,。但是，其zui大的缺點(diǎn)是不經(jīng)濟(jì),，特別是針對(duì)中國(guó)的具體情況,，一次性使用相對(duì)費(fèi)用較高。另外,，薄膜裝填法的保護(hù)柱所裝填的色譜填料有限,，只能提供有限的保護(hù)作用；不過(guò)也因?yàn)樗b填的色譜料較少,，保護(hù)柱的長(zhǎng)度也較短,，所以對(duì)分析樣品的保留時(shí)間的影響也很小,。另一種保護(hù)柱結(jié)構(gòu)其實(shí)質(zhì)是縮短了色譜分析拄，設(shè)計(jì)方式上有直連式,、手緊式或整體式,。整體式設(shè)計(jì)是由色譜的生產(chǎn)廠商直接安裝在色譜分析柱上的，必須與色譜分析柱一同訂貨,，可以非常方便地使用,，但不能夠被修改。直連式結(jié)構(gòu)設(shè)計(jì)可在任何時(shí)候有色譜工作者來(lái)安裝連接,，可以與任何品牌的色譜分析柱連接使用,，而且還可以根據(jù)樣品的相關(guān)情況選擇不同的保護(hù)柱長(zhǎng)度。手上緊即可,。另外從保護(hù)柱結(jié)構(gòu)又分為是否可以更換保護(hù)柱柱芯,。可以降低保護(hù)柱的使用成本,。
一般來(lái)說(shuō),，保護(hù)柱填料的選擇是由分析柱的填料決定的，正常情況下可以選擇與分析柱一樣的色譜填料,，但是,，根據(jù)實(shí)際工作的需要，也可以不必與分析柱的填料*匹配,。
二,、什么時(shí)候應(yīng)該更換保護(hù)柱
當(dāng)滿足下列條件之一時(shí)就應(yīng)該更換保護(hù)柱。
a,、色譜柱的理論塔片數(shù)下降15%以上,；
b、色譜柱柱前壓上升15%以上,；
c、zui難分離的物質(zhì)對(duì)分辨率下降15%以上,；
d,、樣品進(jìn)樣次數(shù)超過(guò)150次；
e,、流動(dòng)相通過(guò)1500倍的色譜柱體積,。
三、保護(hù)柱/保護(hù)柱芯更換步驟
1.將色譜柱與保護(hù)柱斷開(kāi),，將保護(hù)柱（或柱芯換下）
2.將保護(hù)柱換上（或?qū)⒈Ｗo(hù)柱芯所有膠帶除去,，將柱芯換上，將保護(hù)柱接上）
3.將換好的保護(hù)柱用甲醇沖洗30分鐘
4.將色譜柱接上
四,、在線過(guò)濾器 預(yù)柱 保護(hù)柱的原理區(qū)別
在線過(guò)濾器在泵和進(jìn)樣閥之間,，只有篩板,，只是物理過(guò)濾，
保護(hù)柱在進(jìn)樣閥和色譜柱之間,，有填料,，可吸附物質(zhì)
預(yù)柱是個(gè)混淆的概念，pre-column,一般可直譯為預(yù)混合柱,，放在泵和進(jìn)樣閥之間,，有硅膠填料，可以降低色譜柱填料被酸,、堿流動(dòng)相溶解
同時(shí)也有把預(yù)柱當(dāng)保護(hù)柱的
五,、清洗
保護(hù)柱在清洗時(shí)首先要拆下分析柱，以免洗脫物進(jìn)入分析柱,；然后選擇適當(dāng)?shù)牧鲃?dòng)相進(jìn)行沖洗,。
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