色譜柱的使用壽命，除了與所分析的樣品和流動相及使用頻率有關(guān)系外,，zui主要的是與日常的維護密切相關(guān),。為延長色譜柱的使用壽命，維護您的利益,，請仔細閱讀此部分,。
    色譜柱的使用壽命主要是分為柱效和柱壓兩個指標(biāo)來衡量，如果一支色譜柱柱效太低或柱壓太高,，通常被認為該色譜柱已經(jīng)結(jié)束,。因此，延長色譜柱使用壽命的關(guān)鍵是,，消除引起柱效下降和柱壓升高的因素,。以下是色譜柱的日常維護方法：
一、流動相的pH應(yīng)在使用的范圍內(nèi)
    由于填料中存在Si-C和Si-O鍵,，流動相超過其pH范圍將會導(dǎo)致硅膠基質(zhì)流失和鍵合相碳鏈斷裂,，使柱效下降，使用壽命變短,。由于流動相的pH 控制不當(dāng)而對色譜柱造成的損害,，通常很難使色譜柱恢復(fù)，因此必須認真對待,，嚴(yán)格控制流動相的pH值,。
二、去除樣品和流動相中的固體顆粒
      樣品和流動相中含有的固體顆粒物質(zhì)會堵塞色譜柱篩板,，篩板被堵住不僅會引起柱壓的升高,，而且也會引起柱效下降，因為篩板的堵塞會引起液流不均,，導(dǎo)致色譜峰型拖尾,、變寬，從而使柱效下降,。因此,，建議使用超純水和色譜純試劑，在分析樣品前對樣品進行針筒過濾,，流動相過0.45μm濾膜,。
三,、使用保護柱或在線過濾器
    樣品和流動相經(jīng)過濾后并不能*消除固體顆粒物質(zhì),，因為泵的磨損、密封圈和管路的老化也會產(chǎn)生固體顆粒物質(zhì),，這些固體顆粒被流動相帶入色譜柱,，堵塞篩板,，導(dǎo)致柱壓升高、柱效下降,。保護柱和在線過濾器上都有篩板,，其孔徑與色譜柱孔徑相同，因此可以阻止固體顆粒物質(zhì)到達色譜柱,，有效防止色譜柱篩板的堵塞,。由于柱壓升高在分析故障中占很大比例，因此,，除對樣品和流動相進行過濾外,，建議您在色譜柱進樣端加上保護柱或在線過濾器。
    如果確認色譜柱柱壓升高是由于進樣端篩板被堵引起的,，可選擇以下方式進行補救：
    1,、先在色譜柱前加上保護柱或在線過濾器，然后用甲醇,、水=20/80ml/min反向沖色譜柱180min,。
    2、先在色譜柱進樣端加上保護柱或在線過濾器,，然后反向使用,。
四、正確使用緩沖鹽
    緩沖鹽通常易溶于水,，難溶于有機溶劑,，因此緩沖鹽使用不當(dāng)會使其析出，堵塞填料基質(zhì)上的微孔和顆粒間的空隙,，使填料板結(jié),，柱壓上升；同時阻礙了基質(zhì)上鍵合的碳鏈自由舒展,，使色譜柱的保留能力下降,，柱效降低。緩沖鹽析出后,，去除非常困難,，因此，正確的使用緩沖鹽對延長色譜柱使用壽命非常重要,。
   正確使用緩沖鹽的目的是防止緩沖鹽析出,，因此正確使用緩沖鹽的方法可歸結(jié)為一句話：使用前要過濾，使用后要沖洗,。具體方法如下：
   1,、等度條件：使用緩沖鹽前和使用后需用過渡流動相以1.0ml/min流速沖洗60min；使用后去除緩沖鹽的另一個方法是用過渡流動相以0.2ml/min流速沖洗色譜柱過夜。
   2,、梯度條件：用含有緩沖鹽的流動相跑梯度之前,，用與初始流動相組成相同的過渡流動相以1.0ml/min流速沖洗60min，再用該過渡流動相以1.0ml/min沖洗色譜柱120min,。含緩沖鹽流動相的梯度設(shè)定應(yīng)盡量平緩,，以避免梯度過程中緩沖鹽析出。
   注意：過渡流動相是指有機相和水相的組成與分析流動相相同,，區(qū)別只是過渡流動相不含緩沖鹽,。
   3、緩沖鹽析出的補救方法：
   1）方案1：用甲醇/20/80以1.0ml/min流速35攝氏度條件下反向沖洗色譜柱120min
   2）方案2：用甲醇/水=20/80以0.2ml/min流速反向沖洗色譜柱過夜,。
五,、防止強保留物質(zhì)在色譜柱上存留
    強保留物質(zhì)和大分子化合物在色譜柱中累積，對樣品中的化合物產(chǎn)生額外的保留行為,，不僅引起峰型變寬,、拖尾，使柱效下降,，同時也會引起保留時間的變化,，累積到一定程度時還會導(dǎo)致柱壓升高。由于強保留物質(zhì)和大分子化合物對色譜分離的影響是一個累積效應(yīng),，需要一定的時間才會體現(xiàn)出來,，但對許多藥品特別是復(fù)雜樣品而言，很難判斷其是否是含有強保留物質(zhì),，因此要防止強保留物質(zhì)的累積,，需要在每天的日常維護中用純甲醇或乙氰清洗色譜柱。 clin-lab.com
清洗方法：
   1,、未使用緩沖鹽：每天分析完成后,，先用上述方法除去緩沖鹽，然后再用甲醇或乙氰反向沖洗色譜柱60min,。
   2,、使用過緩沖鹽：分析完成后，先用上述方法除去緩沖鹽,，然后在用純甲醇或乙氰反向沖洗色譜柱60min
   3,、補救方法：
水——乙氰——氯仿（或異丙醇）——乙氰——水
每一步以1.0ml/min流速反向沖洗色譜柱60min。